免疫学检测技术的实验室应用 .ppt

免疫学检测技术的实验室应用 济医附院检验科 陈新科 * ppt课件 免疫学检测技术： 就是利用抗原和抗体高度特异性结合的原理和方法，检测分析各样品中的目标物质，以监控物品质量、检测机体免疫机能和诊断某些疾病的体外检测方法。 * ppt课件 * ppt课件 凝集反应 直接凝集反应： 颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。 临床应用：菌种鉴定、血清学分型；血型鉴定及抗体效价测定。 * ppt课件 玻片凝集 * ppt课件 间接凝集反应: 可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表面，然后与相应的抗体或抗原反应，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。 临床应用：梅毒螺旋体颗粒凝集实验（TPPA）、肺炎支原体颗粒凝集实验等。 间接凝集反应 * ppt课件 TPPA * ppt课件 沉淀反应: 可溶性抗原或抗体在适宜条件下与相应的抗体或抗原反应发生结合，出现肉眼可见的沉淀物。 * ppt课件 免疫沉淀 液体内沉淀反应 凝胶内沉淀反应 免疫电泳技术 免疫浊度技术 絮状沉淀试验 环状沉淀试验 单向扩散试验 双向扩散试验 试管法 平板法 免疫电泳 对流免疫电泳 火箭免疫电泳 免疫固定电泳 透射免疫比浊turbidimetermeasure 散射免疫比浊nephelomitermeasure * ppt课件 免疫比浊技术原理 当可溶性抗原与相应抗体特异结合，二者比例合适时，在特殊的缓冲液中它们快速形成一定大小的抗原抗体复合物，使反应液体出现浊度。利用现代光学测量仪器对浊度进行测定从而检测抗原含量。 检测器 光源 透镜 滤光片 平光线 散 射 透射光 光 检测器 * ppt课件 免疫比浊技术分类： 按光路 透射免疫比浊 散射免疫比浊 按测定时间 终点比浊 速率比浊 按增敏剂 无增敏 PEG增敏 胶乳增敏 * ppt课件 透射比浊法和散射比浊法光路 检测器A 检测器B IC I0 Iθ I θ 透射比浊法 散射比浊法 透射免疫比浊法是在180°角， 即在直射角度上测定光透射强度。 散射比浊法在光路的5°～96°角的方向上测量散射光强度。 * ppt课件 临床应用： 特定蛋白检测：免疫球蛋白（IgE、IgA、IgG、IgM）、尿微量白蛋白、铜蓝蛋白、补体等。 * ppt课件 免疫标记技术： 在已知抗体或抗原上标记易显示的物质，通过检测标记物来反映抗原抗体反应的情况，从而间接地测出被检抗原或抗体的存在与否或量的多少的一种生物技术。 常用的标记物：荧光素、酶、化学发光物质、放射性核素及胶体金等。 * ppt课件 免疫标记技术 = 抗原抗体反应 示踪物标记 灵敏性 特异性 免疫标记技术的主要特点： 高特异性、高灵敏性 免疫技术+ 标记技术 酶 荧光素 同位素 * ppt课件 * ppt课件 双抗体夹心法 临床应用： 乙肝表面抗原、e抗原、丙肝核心抗原、乙肝PreS1抗原、PCT、PTH、ACTH、C-肽、Insulin、TSH、TG、AFP、CEA、CA125、CA153、CA199、CA72-4、NSE、CYFRA21-1、ProGRP、TPSA、FPSA、β-HCG、PRL、LH、FSH等。 * ppt课件 双抗原夹心法 临床应用： 乙肝表面抗体、梅毒抗体、HIV抗体等。 * ppt课件 竞争法 临床应用： 乙肝e抗体、乙肝核心抗体、FT3、FT4、T3、T4、A-TG、A-TPO、TRAb、CORT、孕酮、睾酮、E2、药物浓度等。 * ppt课件 竞争法 剂量-反应曲线 * ppt课件