分解纤维素的细菌的分离.pptVIP

2021/2/6 * 　　思考:为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物? 在选择培养的条件下,可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖,而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“浓缩”的作用 2021/2/6 * 梯度稀释 　　按照课题1的稀释操作方法,将选择培养后的培养基进行等比稀释,稀释最大倍数到106 2021/2/6 * 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 1. 制备培养基:　　参照旁栏中的比例 2. 涂布平板:　　将稀释度为104～106的菌悬液各取0.1ml涂布在培养基上,30℃倒置培养 2021/2/6 * 2021/2/6 * 挑选产生透明圈的菌落 挑取产生明显的透明圈的菌落,一般即为分解纤维素的菌落。 接种到纤维素分解菌的选择培养基上,在300C－ 370C培养,可获得纯培养。 2021/2/6 * 5.刚果红染色法 方法一:先 ,再加入刚果红,进行颜色反应。 方法二:在 时就加入刚果红。 培养微生物 倒平板 　　思考:这两种方法各有哪些优点与不足? 2021/2/6 * 这两种方法各有哪些优点与不足? 颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用 操作繁琐 刚果红会使菌落之间发生混杂 操作简便,不存在菌落混杂问题 1.产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈 2.有些微生物能降解色素,形成明显的透明圈。 P29旁栏思考题 2021/2/6 * 方法一中NaCl溶液的作用? 思考: 漂洗作用,洗去与纤维素结合不牢的刚果红,以免出现的透明圈不够清晰。用这方法可以判断酶活力的大小,实际上刚果红是结合到培养基的多糖底物,但分解纤维素的细菌可以产生纤维素酶,能分解这个多糖底物成为单糖,这样刚果红就不能结合上去了,氯化钠溶液就可以使结合不牢的刚果红洗去,这样就留下大大小小的透明圈,大的透明圈当然分解纤维素的能就强! 2021/2/6 * 1.培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌落 对照的培养基在培养过程中没有菌落生长则说明培养基制作合格。如果观察到产生透明圈的菌落,则说明可能获得了分解纤维素的微生物。 四、结果分析与评价 2021/2/6 * 2.分离的结果是否一致 由于在土壤中细菌的数量远远高于真菌和放线菌的数量,因此最容易分离得到的是细菌。但由于所取土样的环境不同,不同同学也可能得到真菌和放线菌等不同的分离结果。 四、结果分析与评价 2021/2/6 * 为了确定分离得到的是纤维素分解菌,还需要进行_____________实验,纤维素酶的发酵方法有______ 发酵和______ 发酵。纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的________ 含量进行定量测定。 发酵产纤维素酶 液体 固体 葡萄糖 五、课题延伸 2021/2/6 * 分解纤维素的微生物的分离 纤维素酶 种类、作用、催化活力 刚果红染色 筛选原理 实验设计 土壤取样 选择培养 涂布培养 纯化培养 前置染色法 后置染色法 富含纤维素土壤 增大分解菌含量 染色鉴别 分离出分解菌 课堂总结 2021/2/6 * 1.在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌,符合下列哪一生物学观点( ) A.生物结构与功能相适应的观点B.生物结构与功能整体性观点 C.生物与环境相适应的观点D.生物发展进化的观点 练一练: C 2021/2/6 * 2.从土壤中分离获得某种微生物的步骤是( ) ①土壤取样　②梯度稀释③选择培养 ④菌悬液涂布平板⑤挑选出单个菌落 A. ①②③④⑤ B.①③②④⑤ C.①②④③⑤ D.①④②③⑤ B 2021/2/6 * 3. 有关选择培养正确的叙述是( ) A. 可以增加纤维素分解菌的浓度 B. 可以减少纤维素分解菌的浓度 C. 所用培养基是固体培养基 D. 所用培养基是平板培养基 A 2021/2/6 * 4.下列关于纤维素酶的说法,错误的是 （ ） A. 纤维素酶是一种复合酶,至少包括三种 B. 纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖 C. 纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁 D. 葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖 D 2021/2/6 * 5.利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌,下列说法错误的是（ ） A. 刚果红能与纤维素形成红色复合物 B. 刚果红能与纤维二糖形成红色复合物 C. 刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物 D. 若培养基上产生了透明圈,则说明已筛　选出了纤维素分解菌 B 2021/2/6 * D 6.纤维素分解菌的选择培养基有选择作用,原因在于其含有 (