杂交桉组织培养快速繁殖试验研究.docVIP

杂交桜组织培养快速繁殖试验研究 摘要以杂交桜子代优良单株的萌芽条顶芽或带腋芽茎段为外植体，采用4 种基本培养基和不同浓度牛长调节剂的组合对比试验，筛选出最佳诱导培养基为 Bl+0.5mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA,增殖培养基为 Bl+0.5mg/L 6-BA+0.3mg/L NA A,牛根培养基为B2+0.5mg/L ABT1+O.2mg/L IB Ao增殖倍数达3倍以上， 牛根率达50%?86%,其屮ZL11无性系可达工厂化育苗水平。 关键词杂交桜；培养基；组织培养；快速繁殖 桜树速牛丰产、用途广，为我国短周期工业原料林的主要造林树种。近20 年來，广西、广东、福建、海南、四川等省区桜树发展迅速，经过多年的栽培选 育，H前已有一些优良无性系（如DH32-29）广泛应用于生产，形成以优良无性 系组培苗为主的造林局而。但长期以来，福建省缺乏自主选育的优良品种，牛产 上栽培的无性系大多是从广西、广东引进或是在已有无性系林分屮进行选育，有 些无性系虽然速牛，但抗逆性较差，如在一些牛态环境相对较差的地区易遇受风 害。为培育具有福建省特色、适宜闽南地区种植的桜树优良新詁种，推动桜树良 种化进程，2002年开始，漳州市林业局依托当地己有资源，同时从其他地区引 入新的优良基因资源，以选育速牛、抗逆性强，特别是抗病虫害和抗风性强的扌安 树优良新殆种为H标，开展杂交、子代测定，并从屮选出优良单株若干个进行组 培繁殖试验，获得了 ZL9、ZL11、ZL15等杂交桜新无性系。木试验研究了杂种 桜无性系组培技术，以期完善无性系扩繁技术体系，并为无性系扩繁应用提供参 考。 1材料与方法 1.1试验材料 无性系组培的外植体来自漳州天马国有林场杂交桜子代测定林优良单株 （ZL9、ZL11、ZL15）的树干基部萌芽条（杂交樓新无性系来源及母株性状见 表1）,外植体经保鲜携带回漳州市林业组培屮心实验室。枝条经流水冲洗后， 再用洗衣粉水浸泡30min,然后在超净工作台上用0.1% HgC12溶液消毒8min, 无菌水冲洗4?5次。然后切除两头及叶柄，切取（）.5-1.0cm长带腋芽的茎段作为 外植体，斜插或直插于各种培养基上。 表1杂交校新无性系来源及母株性状 无性系 优树 号 杂种子代 家系号 杂交组合 母株性状（三年生） 胸径〃cm树高〃m ZL9 9 5 E.u3101 x￡.gl8705 15.8 15.1 ZL11 11 5 E.u3101xE.gl8705 14.3 14.5 ZL15 15 8 E.u3101xE.u(T104) 13.5 14.0 注:E.u为尾叶按；E?g为巨按；E.u（T104）为尾叶按14531、14532、 12895J2897种源混合种后代，来自热带林业研究所。 1.2试验方法 121基本培养基。用MS、Bl （Bl为巨尾桜优良无性系继代基本培养基）、 H和White作为基本培养基，附加O.5mg/L 6-BA和0.2mg/L NAA。在相同的培 养环境条件下，每组重复3次，每次50个。 1.2.2增殖和牛根培养基。增殖培养基分别附加0.3mg/L, 0.5mg/L 0.7mg/L, 1.0mg/L 6-BA, O」mg/L、O.3mg/L O.5mg/L NAA0 采用完全随机组合设计，每 个处理20瓶，每瓶5个芽，重复3次；牛根培养附加O?lmg/L、O.5mg/L 1.0 mg/L ABT1号牛根粉，0.1 mg/L. 0.2mg/L、O.3mg/L IBA,采用完全随机组合设计，每 个处理10瓶，每瓶10个芽，重复3次。 1.2.3培养条件。用食糖代替蔗糖，30g/L食糖+6?8g/L琼脂，pH值5.8。培 养温度26±2°C,采用自然光源，光强2 000-3 OOOLx,光照吋数10?12h/d。 2结果与分析 2」基本培养基的筛选 外植体接种后经20?35d培养，观察牛长状况。由表2可以看出，采用MS 和Bl培养基，芽点绿，萌发率相差不大，但B1从芽发牛率高，MS的芽点有玻 璃化现象。H和White培养基的萌芽率和牛长表现明显不如MS和B1。同时可 看出，采用B1基本培养基，ZL9、ZL11、ZL15无性系的萌芽率均明显高于其他 3种基本培养基，分别达到68%、64%、62%,培养5?6个刀后，丛牛芽进入了 旺盛增殖期。通过比较分析，B1基木培养基的萌芽效果最佳，其对促进丛牛芽 增殖效果显著。 表2 4种培养基对茎芽萌发与生长的比较 基本培 养基 无性 系号 茎段 个 培养时间 d 萌发率 % 生长表现 MS ZL9 50 35 62 板务祖、色绿、有少 ZL11 50 35 60 d丛生芽、有玻璃化 ZL15 50 35 56 现象 Bl ZL9 50 35 68 腋芽粗壮、色绿、有 ZL11