细胞内膜系统的研究.pptVIP

;;5. 磷脂翻转Translocation of phospholipids across the ER membrane ;6. 磷脂的转运: transport by budding：ER→GC、Ly、PM transport by phospholipid exchange proteins（PEP）：ER→other organelles（including Mit and Chl）。;（二）sER的功能;三、内质网与基因表达的调控;内质网应激（ER Stress) 是指由于某种原因使细胞内质网生理功能发生紊乱的一种亚细胞器病理状态。 ;第三节 高尔基体;电镜下高尔基体结构是由扁平膜囊和大小不等的囊泡构成 高尔基体是极性的细胞器：位置、方向、物质转运与生化极性;3. 高尔基体的4个组成部分;Regions of the Golgi apparatus ;细胞内膜系统的研究;细胞内膜系统的研究;高尔基体顺面网状结构;高尔基体反面网状结构;4. 高尔基体各部膜囊的４种标志 细胞化学反应;;;二、 高尔基体的功能;(一）高尔基体与细胞的分泌活动;分选的tag有3类： 蛋白质的分选及其转运的信息仅存在于编码该蛋白质的基因本身 ? 流感病毒囊膜蛋白特异性地转运? 上皮细胞游离端的质膜。 ? 水泡性口炎病毒囊膜蛋白特异性地转运?上皮细胞基底面的质膜。 ? 水泡性口炎病毒囊膜蛋白等膜蛋白在胞质基质侧的双酸分选信号（Asp-X-Gln或DXE）起重要的作用。;细胞内膜系统的研究;2. 6-磷酸甘露糖：溶酶体酶的分选信号，M6P?反面膜囊M6P受体。 在肝细胞中溶酶体酶还存在不依赖于M6P的另一种分选途径。 3. 依赖与基底面的质膜：; 特 征 ;2. 蛋白质糖基化的特点及其生物学意义;;3. 蛋白聚糖在高尔基体中组装 蛋白聚糖在高尔基体中组装与丝氨酸残基相连的是木糖，而不是N－乙酰半乳糖胺。4. 植物细胞中高尔基体合成和分泌多糖。;（三）蛋白质在高尔基体中酶解加工;2. 加工方式多样性的可能原因： ?确保小肽分子的有效合成； ?弥补缺少包装并转运到分泌泡中的必要信号； ?有效地防止这些活性物质在合成它的细胞内起作用。 3. 肽链酪氨酸残基的硫酸化作用;三、高尔基体与细胞内的膜泡运输;;第四节 溶酶体与过氧化物酶体;1. 溶酶体的发现 1949年，de Duve大鼠肝，发现酸性磷酸酶活性主要在线粒体中。蒸馏水比蔗糖等渗平衡液中活性高。放置后活性更高，但与沉淀物线粒体无关。 1955年，de Duve 和Novikoff用电镜证明了溶酶体的存在。 2. 一种异质性（heterogenous)的细胞器 表现在形态、结构、组分、发育阶段等方面。;(1). 结构与类型;; 小鼠脾脏巨噬细胞中的溶酶体 用电镜细胞化学技术显示其中含有的酸性磷酸酶， M：线粒体，L：溶酶体（朴英杰） ;动物细胞溶酶体系统示意图 ;(2). 溶酶体膜的特征： ?嵌有质子泵，形成和维持溶酶体中酸性的内环境； ?具有多种载体蛋白用于水解的产物向外转运； ?膜蛋白高度糖基化，可能有利于防止自身膜蛋白的降解 (3). 溶酶体的标志酶： 酸性磷酸酶（acid phosphatase）;二、溶酶体的功能;溶 酶 体 与 疾 病;;溶酶体酶的合成及N-连接的糖基化修饰（RER） ;Figure 4-24. Synthesis of the mannose 6-phosphate marker on a lysosomal hydrolase. ;细胞内膜系统的研究;（二）、分选途径多样化;四、过氧化物酶体;鼠肝细胞超薄切片所显示的过氧化物酶体（P）和其它细胞器如线粒体（M）等（Albert et al. ，1989）;（二）、过氧化物酶体与溶酶体的区别;;（三）、过氧化物酶体的功能;;（四）、过氧化物酶体的发生;;第五节 细胞内蛋白质的分选与细胞结构的组装;一、分泌蛋白合成的模型---信号假说;（一）、信 号 假 说; 信号肽的一级序列 信号肽一级序列由疏水核心（h）、C端（c）和N端（n）三个区域构成。以血清白蛋白和HIV-1型病毒的糖蛋白gp160信号肽为例，显示出两者的n区长度明显不同 ;细胞内膜系统的研究;实验 组别 ;;细胞内膜系统的研究;? 起始转移序列和终止转移序列的数目决定多肽跨膜次数;?跨膜蛋白的取向;基本的特征： 蛋白质在细胞质基质中合成以后再转移到这些细胞器中，称后转移(post translocation)。 蛋白质跨膜转移过程需要ATP使多肽去折叠，还需要一些蛋白质的帮助（如热休克蛋白Hsp70）使其能够