基因工程训练题.docxVIP

1.干扰素是动物和人体细胞受到病毒感染后产生的一种糖蛋白，具有抗病毒、抑制细胞 增殖及抗肿瘤作用。 利用基因工程技术培育能生产干扰素的植物流程如图所示。 请回答下列问题： (1)首先获取的动物干扰素基因称为 ________。利用 PCR 技 术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是 _______________________ 过程①中剪切质粒和目的基因时所需要的工具酶是 ________和 ________ 。酶切后，目的基因形成的两个黏性末端 序列 ________(相同，不相同） (3) 过程②中将重组质粒导入根瘤农杆菌时，常用 ______处 限制酶 识别序列和切割位点 理根瘤农杆菌，其目的是 ______________________________ 。 EcoRⅠ ↓ (4) 在培育愈伤组织的固体培养基中，除了无机盐、有机营 G ATTC BamH Ⅰ ↓ 养物质、琼脂、植物激素外，还需添加卡那霉素。卡那霉素的 G ATCC SmaⅠ ↓ 作用是 ________________________________ 。在分子水平上通 CCC GGG 常采用 ________技术检测干扰素基因是否导入受体细胞。 ApaⅠ ↓ GGGCC C 2、内皮素 (ET) 是一种含 21 个氨基酸的多肽。 内皮素主要通过与靶细胞膜上的内皮素受 体结合而发挥生物学效应。 ETA 是内皮素的主要受体，科研人员试图通过构建表达载体，实 现 ET A 基因在细胞中高效表达，为后期 ET A 的体外研究奠定基础。其过程如下 (图中 SNAP 基因是一种荧光蛋白基因，限制酶ApaⅠ的识别序列为 C↓CCGGG ，限制酶 XhoⅠ的识别序 列为 C↓TCGAG) 。请分析回答： (1)完成过程①需要的酶是 ________。 (2) 过程③中，限制酶 XhoⅠ切割 DNA ，使 ________ 键断开，形成的黏性末端是 ________________。用两种限制酶切割，获得不同的黏性末端，其主要目的是 ________________________ 。 过程④中需要 ________酶，去构建重组质粒。过程⑥中，要用________预先处理大 肠杆菌，使其处于容易吸收外界的DNA 的状态。 (4)利用 SNAP 基因与 ET A 基因结合构成融合基因，目的是 __________________。 (5)人皮肤黑色素细胞上有内皮素的特异受体， 内皮素与黑色素细胞膜上的受体结合后， 会刺激黑色素细胞的分化、 增殖并激活酪氨酸酶的活性， 从而使黑色素急剧增加。 美容时可 以利用注射 ET 达到美白祛斑效果，试解释原因： ________________________________ ， A 抑制了内皮素对黑色素细胞的增殖和黑色素的形成。 3、天然玫瑰因缺少控制合成蓝色色素的基因 B 而不能开蓝色花。科学家从开蓝色花的矮牵牛中提取了基因 B 后，利用生物工程技术培育出了开蓝色花的玫瑰。下图为该育种过程的操作流程。 注： Ampr 表示氨苄青霉素抗性基因， Tetr 表示四环素抗性基因。外源 DNA 插入到 Ampr 或 Tetr 中会导致相应的基因失活。限制酶 EcoRⅠ、 Hind Ⅲ和 BamHⅠ的识别序列及切割位点均不相同。请回答下列问题： (1)图中将基因 B 导入玫瑰细胞的方法称为 ________。选择 Ti 质粒作为运载体的原因是 Ti 质粒上的 ________可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的 DNA 上。 (2)在构建重组 Ti 质粒时，应选用图中的 ________(限制酶 )。有人用该种限制酶分别切 割 Ti 质粒和基因 B 后混合，加入 DNA 连接酶进行反应，用得到的混合物直接转化细菌甲。 结果得到了四种细菌甲：未被转化的、含环状基因 B 的、含 Ti 质粒的和含重组 Ti 质粒的。筛选目的细菌甲时，先用含 ________的固体培养基培养，不能生长的是 ________的细菌甲；然后再将能生长的细菌甲接种到含 ________ 的固体培养基中，目的细菌甲在此培养基中 ________(填“能”或“不能”  )生长。 (3) 由玫瑰韧皮部细胞形成组织乙的过程，实质是  ______的过程。 4、科学家通过利用 PCR 定点突变技术改造 Rubisco 酶基因，提髙了光合作用过程中 Rubisco 酶对 CO2 的亲和力，从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题： (1)PCR 过程所依据的原理是 __________，该过程需要加入的酶是 __________。利用 PCR 技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成 _