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菊花组织培养论文 单位：迁安市马兰庄镇初级中学 姓名：胡瀚文 摘 要：通过组培试验，初步得出了菊花组培育苗时最佳的诱导 培养墓配方:用花瓣做外植体，在诱导培养基上接种诱导成愈伤组织, 然后再在分化培养基上快速分化，之后在生根培养基上生根壮苗，再 出瓶培养成生产用苗。 关键词：菊花；愈伤组织；培养基；激素 菊花 菊科多年生宿根花卉，别名黃花、节华、秋菊、金蕊等。菊花原产屮国， 栽培历史悠久，品种丰富，花型花色千变万化，观赏价值极高。它是屮国十大传 统名花之?，也是世界上深受广大民众喜欢的园艺植物之一，与香石竹、月季、 唐莒蒲一起被称为四大切花，畅销国际市场。 组织培养发展简史 1838-1839年，德国科学家Schleide和Schwann发表了细胞学说,奠定 了组织培养的理论基础。 1902年，徳国植物学家Haberlandt根据细胞学说，提出单个细胞的植物细 胞全能性(totipotency)理论。 1904年，Hanning最先成功地培养了萝卜和辣根菜的胚。 1922年，Knudson采用胚培养法获得大量兰花幼苗。 1934年，White用番茄根尖建立起第一个活跃生长的无性繁殖系，从而使 非胚器官的培养首先获得成功。 1958年，英国科学家Steward等用胡萝卜根的愈伤组织细胞进行悬浮培养, 成功诱导出胚状体并分化为完整的小植株，不但使细胞全能性理论得到证实，而 且为组织培养的技术程序奠定了基础。 1962年，Murashinge和Skoog在烟草培养屮筛选出至今仍被广泛使用的 MS培养基。 1964-1966年，印度科学家Guha和Maheswari在曼陀罗花纱培养屮首次由 花粉诱导得到了单倍体植株。 1972年，Carlson通过两个种的烟草原生质体融合培养，获得了第一个体 细胞杂交的杂种植株。…… 材料与方法 实验材料 （1） 实验植株 （2） 实验器材 高压灭菌锅、超净工作台、培养箱、冰箱、天平、平底试管、剪刀、银子、 平皿、酒精灯、滤纸、烧杯、玻璃棒、橡胶塞、ph试纸。 （3） 实验试剂 贮备液II (200 X )KIH3BO3MnSO4 贮备液II (200 X ) KI H3BO3 MnSO4.4H2O ZnSO4.7H2O Na2MoO4.2H2O CuSO4.5H2OCoC12.6H2O NH4NO3 KNO3 CaCl2.2H2O MgSO4.7H2O KH2PO4 33g 38g 8.8g （含结晶水换算） 7.4g （含结晶水换算） 3.4g V=1000ml （按顺序逐一溶解） 0.166g l?24g 4.460g 1.720g 0.050g 0.005g 0.005g 贮备液III (200X) Na2.EDTA.2H2O V二200ml （按顺序逐一溶解，调PH到5?5） 1.492g FeSO4.7H2O l.」12g （分开配再混在一起，FeSO4.7H2O不能加热要H然溶解，否则Fe2+会被氧化 成 Fe3+） 贮备液IV (200X )肌醇烟酸 贮备液IV (200X ) 肌醇 烟酸 盐酸毗哆醇 盐酸硫胺素甘氨酸 V=1000ml （按顺序逐一溶解） 20g O..lg o.lg 0.02g0.4g 激索：生长索一Q ?蔡乙酸(NAA) 其他：蔗糖、琼脂粉、实验方法 细胞分裂索一6?节基腺嚓吟(6-BA) 配置四种储备液，见实验试剂 配置激素 I mg/ml 6-BA：称取50mg的6-BA于烧杯屮，加适量的氢氧化钠使其混匀， 再定容到50ml,倒入试剂瓶屮。 1 mg/ml NAA：称取50mg的NAA于烧杯小，加适量的无水乙醇使其混匀， 再定容到50ml,倒入试剂瓶屮。 MS培养基的配置 称取3g蔗糖于250ml的烧杯屮，向其屮加入适量的水溶解，再向其屮加入贮 备液 I 5 ml, II0.5 ml, III 0.5 ml, IV 0.5 ml,加水混匀定容到 100mlo 分装 平底试管，每管20ml,,再往每管屮加入0.14g的琼脂粉，最后往每管屮加入 不同浓度的生长素和细胞分裂素，见下表： 序号 6-BA NAA 1 1.0 mg/Iu 20ul 0.1 mg/L 2ul 2 1.0 mg/L 20uI 0.3 mg/L 6ul 3 2.0 mg/L 40ul 0.5 mg/L lOul 4 2.0 mg/L 40ul 0.3 mg/L 6ul 5 3.0 mg/L 60ul 0.3 mg/L 6ul ⑷ 调PH7.0,塞上橡胶塞，置灭菌锅屮121 °C灭菌20mino 菊花花瓣的预处理 取菊花花瓣，用H来水洗3?5次，置于小烧杯屮浸泡半小时，用70%乙醇浸 泡15s,无菌水清洗3次后,用2%次氯酸钠(吐温802滴)浸泡10 min,再 用无菌水洗3?4次。于灭过菌的