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菌种培养技术 如何选育菌种？ 为了获得适合大规模工业生产所需的优良生产菌种，一般首先是从自 然界分离筛选具有产生冃标产物能力的菌种，但这样获得的菌种的生产能 力往往较低，生理生化特性不一定能满足生产要求，还需要进行大量的诱 变选育，进一步提高其生产能力，改善性能；也可以对现有的生产菌种进 行改造，即经诱变育种，选育出符合实际生产需要的菌株。 自然界中微生物资源异常丰富，土壤、水、空气、腐败的动植物残骸， 都是微生物的主要集居和生长繁衍的场所。其种类之多，至今仍然是一个 难于估测的未知数。以其集居环境（包括特殊和极端环境）、营养类型、 生存方式、生理类型、代谢途径、合成能力等比较，均居生物界之冠。因 此，微生物资源的开发和应用是当今世界瞩目的重大课题。 菌种的分离，不仅是把混杂的各类微生物冇效地分开，得到纯种，更 重耍的是依着生产实际的耍求，有的放矢、快速、准确地将能产生所需产 物，或具冇某种生化反应性能的菌种，从大量的微生物中挑选出來。冇时 是设计一种在分离阶段便能识别所需菌种的方法，更多的是利用特定的方 法分离，获得所需菌种后，再进行识别。为了使获得的菌种能满足工业生 产的需要，须考虑各种性能指标。因此，菌种分离和筛选的方法和策略就 十分重耍。 一般的菌种分离纯化和筛选步骤可分为采样、增殖与分离、发酵与性 能测定等儿个步骤。步骤和方法如下图所示: 3.发酵培养基如何配制？ 首先需了解微生物需要的营养物质。 （1）微生物需要的营养物质 营养物质应满足微生物的生长、繁殖和完成各种生理活动的需要。它 们的作用可概括为形成结构（参与细胞组成）、提供能量和调节作用（构 成酶的活性和物质运输系统）。 微生物的营养物质有六大类要素，即水、碳源、氮源、无机盐、生长 因子和能源。 水 水是微生物的重耍组成部分，在代谢屮占有重耍地位。水在细胞屮有 两种存在形式：结合水和游离水。结合水与溶质或其他分子结合在i起, 很难加以利用。游离水（或称为非结合水）则可以被微生物利用。 碳源 碳在细胞的干物质中约占50%,所以微生物对碳的需求最大。凡是作 为微生物细胞结构或代谢产物中碳架来源的营养物质，称为碳源。 作为微生物营养的碳源物质种类很多，从简单的无机物（CO2、碳酸 盐）到复杂的有机含碳化合物（糖、糖的衍生物、脂类、醇类、有机酸、 芳香化合物及各种含碳化合物等）。但不同微生物利用碳源的能力不同， 假单抱菌属可利用90种以上的碳源，甲烷氧化菌仅利用两种有机物：甲 烷和甲醇，某些纤维素分解菌只能利用纤维素。 大多数微生物是异养型，以冇机化合物为碳源。能够利用的碳源种类 很多，其中糖类是最好的碳源。异养微生物将碳源在体内经一系列复杂 的化学反应，最终用于构成细胞物质，或为机体提供生理活动所需的能量。 所以，碳源往往也是能源物质。 自养菌以C02、碳酸盐为唯一或主要的碳源。C02是被彻底氧化的物 质，其转化成细胞成分是一个还原过程。因此，这类微生物同时需要从光 或其他无机物氧化获得能量。这类微生物的碳源和能源分别属于不同物质。 氮源 凡是构成微生物细胞的物质或代谢产物中氮元素来源的营养物质，称 为氮源。细胞干物质中氮的含量仅次于碳和氧。氮是组成核酸和蛋白质的 重要元素，氮对微生物的生长发育冇着重要作用。从分子态的N2到复杂 的含氮化合物都能够被不同微生物所利用，而不同类型的微生物能够利用 的氮源差异较大。 固氮微生物能利用分子态N2合成自己需要的氨基酸和蛋白质，也能 利用无机氮和有机氮化物，但在这种情况下，它们便失去了固氮能力。此 外，冇些光合细菌、蓝藻和真菌也有固氮作用。 许多腐生细菌和动植物的病原菌不能固氮，一般利用钱盐或其他含氮 盐作氮源。硝酸盐必须先还原为NH+4后，才能用于生物合成。以无机氮 化物为唯一氮源的微生物都能利用钱盐，但它们并不都能利用硝酸盐。 有机氮源有蛋白腺、牛肉膏、酵母膏、玉米浆等，工业上能够用黄豆 饼粉、花生饼粉和鱼粉等作为氮源。有机氮源中的氮往往是蛋白质或其降 解产物。 氮源一般只提供合成细胞质和细胞中其他结构的原料，不作为能源。 只有少数细菌，如硝化细菌利用钱盐、硝酸盐作氮源和能源。 无机盐 无机盐也是微生物生长所不可缺少的营养物质。其主耍功能是：①构 成细胞的组成成分；② 作为酶的组成成分；③ 维持酶的活性；④ 调节 细胞的渗透压、氢离子浓度和氧化还原电位；⑤ 作为某些自氧菌的能源。 磷、硫、钾、钠、钙、镁等盐参与细胞结构组成，并与能量转移、细 胞透性调节功能冇关。微生物对它们的需求量较大（10?10mol/L）,称为 “宏量元素”。没有它们，微生物就无法生长。铁、猛、铜、钻、锌、钳 等盐一般是酶的辅因子，需求量不大（10?10mol/L）,所以，称为“微量 元素”。不同微生物对以上各种元素的需求量各不相同。铁元素介于宏量