实验四革兰氏染色法.pptVIP

初染 将玻片置于玻片搁架上，加草酸铵结晶紫染色液(加量以盖满菌膜为度)，染色1-2min。倾去染色液，用自来水小心地冲洗。 媒染 滴加碘液冲去水迹，再染1-2min，水洗。 脱色 滴加95%乙醇，脱色20-30s立即水洗，以终止脱色。 复染 滴加番红，染色2-3min，水洗。最后用吸水纸轻轻吸干。;干燥后，置显微镜下观察。 被染成蓝紫色者即为革兰氏阳性菌(G?) 被染成红色者是革兰氏阴性菌(G-);革兰氏阳性和阴性菌细胞壁成分比较;G-菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经番红复染后就成红色。 G?菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层失水、孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色，即结晶紫的蓝紫色。;作 业