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第三章 培养基;培养基; 1.培养基的种类及特点; 培养基; 培 养 基 种 类; 基本培养基; 几种基本培养基及特点:;几种基本培养基及特点;几种基本培养基及特点:;通气性较好，便于操作,但营养分布不均，生长发育不一致。;;2.1 水分; 2.2 无机盐(inorganic element);2.3 有机物; 2.3.1 肌醇 ; 2.3.2 天然复合物;椰乳是椰子的液体胚乳，主要含有活性物质。它是使用最多、效果最大的一种天然复合物。一般使用浓度在10～20%，它在愈伤组织和细胞培养中有促进作用。;香蕉泥 1.对pH值缓冲大； 2.用量150-200ml/L； 3.应用在兰花组培。;马铃薯：去皮和芽后使用，用量为150g/L-200g/L，煮30min，再经过滤， 即可加入培养基。马铃薯汁也具有较大的pH缓冲作用，用添加马铃薯的培 养基可得到健壮的植株。 酵母提取液(YE)(0.01～0.05%)，主要成分氨基酸和维生素类。 麦芽提取液(0.01～0.05%)； 苹果汁、番茄汁、柑橘汁，黄瓜的果实，未熟玉米的胚乳等。 以上这些天然复合物的特性是: 遇热较稳定，大多在培养困难时使用，有时有效。; 主要有甘氨酸、丝氨酸、酪氨酸、谷氨酰胺、水解酪蛋白(CH)、水解 乳蛋白(LH)等，是重要的有机氮源。 甘氨酸：能促进离体根的生长，对组织培养的生长也有良好的促进作 用，通常用量为2-3mg/L； 丝氨酸、谷氨酰胺：有利于花药胚状体或不定芽的分化； 水解酪蛋白(CH)和水解乳蛋白(LH)：是多种氨基酸的混合物，对胚状 体或不定芽的分化有良好的促进作用，通常用量是300-2000mg/L。 　;2.3.4 碳水化合物　; 维生素以辅酶形式参与生物催化剂-酶系的活动，参与细胞的蛋白质、脂肪、糖代谢等重要生命活动。 种类：VB1、VB6、Vc及生物素、叶酸、泛酸及泛酸钙等。 浓度：0.1－1.0mg/L　 作用：VB1 　　 促愈伤组织产生，提高活力 VB6 　 促根生长　 Vc　　 防止组织褐变 烟酸 对植物的代谢过程和胚的发育都有一定作用。; 2.4 植物激素; 2.5 培养体支持材料;2.6 辅助性物质; 植物组织培养中材料的预先培养消毒只能进行表面灭菌，而对材料组织内部所带的细菌和霉菌的危害，则可在培养基中添加抗生物质。这对大量通气长期培养，也同样有效。 常用的抗生素有：青霉素、链霉素、庆大霉素等； 用量：5－20%； 注意：抗生素对组织生长有抑制作用，使用要慎重。;链霉素;　抗氧化物;人参等中药;　活性炭; 3.培养基的配制;3.1 母液的配制和保存;; MS培养基配方;; 当培养基配制好以后，应随即进行pH值的调整。最好用酸度计测试， 既快又准，也可用精密pH试纸(应在干燥器中保存)，培养基pH值调整可用 1mol/L HCl或1mol /LNaOH。经高压蒸汽灭菌后，由于某些成分的分解， 如蔗糖的分解或氧化，酸度会增加，即pH值可降低0.2。因此在实际操作 中，经常在灭菌前将培养基的pH调节至比所需pH高0.2个单位。;3.3 pH值的调整;3.4 培养基的分装和灭菌;培养基高压蒸气灭菌所必需的最少时间表;4.生长调节物质的应用;生长素类 ; 赤霉素（GA3）;细胞分裂素（CTK） ;生长调节物质的配制;植物激素的常用溶剂及热稳定性;　 在植物组织培养中生长调节物质的使用浓度因植物的种类、部位、 时期、内源激素等的不同而异，一般生长素的使用浓度范围为0.05～ 10mg/L，细胞分裂素为0.05～20mg/L。 ;生长调节物质的应用方案