生化分离与纯化技术预处理技术简介生物材料预处理.ppt

第三章 生物材料预处理、细胞破碎和液固分离 组织与细胞的破碎 1.物理法 #磨切法 #压力法 #震荡法 #冻融法 2.化学法 用稀酸、稀碱、浓盐、有机溶剂、表面活性剂处理细胞。 3.生物法 组织自溶溶法 利用组织中自身酶的作用改变，破坏细胞结构，释放出目的物的方法。 酶解法 用外来酶处理生物材料 细胞器的分离 为获得结合在细胞器上的一些生化成分或酶系，常常要先得到特定的细胞器再进一步分离有效成分。 方法： 匀浆破碎细胞，离心分离，包括差速离心和密度梯度离心。 一、预处理的概念: 就是从生物材料出发，设法使所制备的目标产物转移到溶液中，同时去除其他悬浮颗粒（如培养基残渣、菌体、细胞或絮凝体等）以及改善溶液的性状，以利于后续各步操作的过程。是生物物质分离纯化的第一个必须步骤。 其他材料需要怎样预处理？ 二、生物材料的预处理过程 1、动物组织和器官要先除去结缔组织、脂肪等非活性部分，然后绞碎，选择适当的溶剂形成细胞悬液。 2、植物组织和器官要先去壳、除脂，再粉碎，选择适当的溶剂形成细胞悬液。 3、发酵液、细胞培养液、组织分泌液以及制成的细胞悬液等根据目标产物所处位置不同进行相应的处理。 问：细胞培养液为什么要预处理？ 发酵液、细胞培养液的预处理 培养液 （一）可溶性黏胶状物质： 多糖、蛋白质、细胞 （二）无机盐： Fe3+、Mg2+ 三、发酵液预处理的目的 1、改变发酵液（培养液）的物理性质，以利于固液分离。 2、去除发酵液（培养液）中部分杂质以利于后续各步操作。 1.细胞及蛋白质的处理 （一）可溶性黏胶状物质： 细胞及蛋白质有什么性质？ （1）加入凝聚剂： 、 凝聚剂作用： 电解质，在电解质中异电离子作用下，胶体双电层电位降低，使胶体不稳定，胶体离子间相互碰撞产生聚集现象 多为无机盐 Al2(SO4)3、FeCl3、ZnSO4 （2）加入絮凝剂： 絮凝剂： 高分子聚合物，长链结构 壳聚糖、海藻算钠、明胶 （3）变性沉淀： 热、紫外线、高压 (4)吸附：(p42,48) 活性炭清除热源、生成沉淀法 四环素发酵液加入黄血盐，硫酸锌生成沉淀，将杂蛋白和菌体吸附在上面 （5）等电点沉淀 调pH （6）加沉淀剂： 水杨酸、苦味酸、过氯酸盐