生物产品分析与检验技术维生素B12的分析与测定维生素B12的分析与检验.pptx

维生素Ｂ12含量的测定;维生素是维持人体正常生理机能所必需的生物活性物质。 维生素广泛存在于动、植物和微生物体内。 维生素类物质的分类（按其溶解性质分） 脂溶性维生素：主要有A、D、E、K等 水溶性维生素：主要有B族（B1、B2、B12等）、维生素C、烟酸、叶酸、泛酸等。 维生素测定方法主要有化学分析法、比色法、分光光度法（紫外和荧光）、层析法、色谱法（气相色谱和高效液相色谱）和微生物法等。 ; 维生素B12对人体的意义 维生素B12的性质 维生素B12测定方法; 维生素B12的主要生理功能是参与制造骨髓红细胞，防止恶性贫血，防止大脑神经受到破坏。 自然界中的维生素B12都是微生物合成的，高等动植物不能制造维生素B12 维生素B12是需要一种肠道分泌物（内源因子）帮助才能被吸收的惟一的一种维生素。 当人体肠胃异常，缺乏这种内源因子，即使膳食中来源充足也会患恶性贫血。 植物性食物中基本上没有维生素B12。;维生素B12(vitamin B12)，又称钴胺素，是含钴的B族维生素之一; 在pH小于3或大于8的强酸或碱性溶液中极易分解，遇强光或紫外线易被破坏。 维生素B12在紫外区278nm、361nm与550nm波长处有最大吸收。 在361nm波长处的吸收峰干扰因素少，通常以361nm作为测定波长。;一、测定方法 测定维生素B12的方法有微生物法、比色法、紫外分光光度法、离子交换层析法、原子吸收分光光度法和高效液相色谱法。紫外分光光度法是较常见的方法。 以维生素B12注射液中B12含量的测定为例介绍紫外分光光度法测定维生素Ｂ12含量的方法。;二、测定原理 维生素B12在紫外区278nm（纳米）、361nm与550nm波长处有最大吸收。在361nm波长处的吸收峰干扰因素少，通常以361nm作为测定波长，测定待测溶液的吸光度，用吸光度计算含量。 三、仪器与试剂 722N型紫外－可见分光光度计，10mL容量瓶，5mL吸量管；0.1g/L维生素B12水溶液，维生素B12注射液(市售品)。;四、维生素B12含量测定步骤 （一）准确吸取0.50mL维生素B12注射液于10mL容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度线，摇匀，得到样品稀释液。 （二）打开722N型紫外－可见分光光度计,预热30min。 （三）将样品稀释液置于1cm石英比色皿中，以蒸馏水作为空白，在361nm波长条件下测定吸光度。 （四）按C63H88CoN14O14P的吸收系数为 计算维生素B12标示量的百分含量。;五、结果记录与计算 （一）计算公式;（二）数据记录 将所测数据填入下表; 1.维生素B12测定时为什么要特别注意在避光的条件下进行? 2.分组讨论维生素B12的性质与其鉴别和含量测定的关系。 3. 完成实训报告