生物产品分析与检验技术中和滴定法测定谷氨酸含量谷氨酸的测定-2.ppt

高等职业教育生物技术及应用专业教学资源库 项目六 氨基酸的分析与检验 任务二 谷氨酸的测定 ■ 谷氨酸是一种酸性氨基酸。分子内含两个羧基，化学名称为α-氨基戊二酸，俗名又叫麸酸。 ■ 有鲜味，微溶于水，而溶于盐酸溶液，等电点为3.22。 ■ L-谷氨酸的用途广泛，它本身作为药品，能治疗肝昏迷症，也可用来生产味精、食品添加剂、香料和用于生物化学的研究。 ■ 检测方法主要有旋光法、滴定法、比色法和色谱 法等 任务二 谷氨酸的测定 二、中和滴定法测定谷氨酸含量 1.原理 谷氨酸具有2个酸性的--COOH基和一个碱性的—NH2基，因此可以用碱液滴定其中—COOH基，以消耗碱的量间接求得谷氨酸含量。 2.试剂与仪器 1.试剂 ■ 试剂： 氢氧化钠标准溶液0.1 mol／L 氢氧化钠标准溶液0.05mol／L，将0.1mol／L氢氧化标准溶液准确稀释1倍。 ■ 仪器：自动电位滴定仪 二、中和滴定法测定谷氨酸含量 3.操作步骤 （1）校正自动电位滴定仪。 （2）样品粉碎后称取0.25ｇ，精确至0.0001ｇ，置于100 mL烧杯中，加水70mL，加热使其全部溶解。 （3）冷却至室温，采用电位滴定法，以0.05 mol／Ｌ标准氢氧化钠溶液滴定，终点pH值控制在7.0，记录消耗氢氧化钠溶液的体积（V）。同时做空白试验，记录消耗氢氧化钠溶液的体积。（V） 二、中和滴定法测定谷氨酸含量 4.结果计算 谷氨酸含量按下式计算： X——样品中谷氨酸含量，％ V——试液消耗氢氧化钠标准溶液的体积，mL V0——空白消耗氢氧化钠标准溶液的体积，mL C——氢氧化钠标准溶液的浓度mol／mL 0.1471——1.00 mL氢氧化钠标准溶液相当于L一谷氨酸 (C5H9N04)的质量，g； m——样品质量，g 二、中和滴定法测定谷氨酸含量 5.结果记录 测定次数 测定内容 1 2 3 实测试样液的旋光度（0） 旋光管长度(即液层厚度)（dm） 1mL试液中含谷氨酸的质量（ g／mL ） 测定时试液的温度（℃ ） 样品中谷氨酸含量（％ ） 样品中谷氨酸含量平均值（g/100mL） 相对平均偏差（%） 二、中和滴定法测定谷氨酸含量 6.注意事项 ◆ 计算结果精确至1位小数。 ◆ 滴定法的原理是酸碱滴定：Ｈ＋＋ＯＨ－→Ｈ２Ｏ，如果试样中混有其他酸的Ｈ＋或者其他碱的ＯＨ－，均会影响测定结果同一样品测定结果，相对平均偏差不得超过0.3%。 7.思考题 ■ 中和滴定法测定谷氨酸含量的操作步骤有哪些？ 二、中和滴定法测定谷氨酸含量 高等职业教育生物技术及应用专业教学资源库