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第二章 基因克隆工具酶;限制性核酸内切酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 核酸酶 核酸修饰酶;NMP NTP dNMP dNTP;一、限制性核酸内切酶（restriction endonuclease）;一、限制性核酸内切酶（restriction endonuclease）;作为分子克隆宿主菌的大肠杆菌（例如DH5α），必须是 （1）rec基因缺陷型的突变体 保证必须不与同外来DNA分子发生遗传重组 （2）限制系统缺陷或限制与修饰系统均缺陷的菌株 保证外来DNA分子不会受其限制酶的降解 ;2+;Ⅱ型酶的作用方式在基因工程中具有十分重要的价值，是基因工程中常用的工具酶。 Ⅰ型酶、Ⅲ型酶的使用不如Ⅱ型酶方便，切割方式不如Ⅱ型酶那样令人满意，在基因克隆中实用价值不大。;属名;H：细菌属名的头一个字母 in：细菌种名的头两个字母 Hin：表示了该菌的物种名称，用斜体 d：代表该菌菌株名称 III：表示该菌具有几个不同的限制与修饰体系，Ⅲ表示该酶是属于第三个限制修饰系统的酶 ;一、限制性核酸内切酶（restriction endonuclease） 4. II 型限制性核酸内切酶的基本特性;EcoRI等产生的5’粘性末端 5‘ … G-C-T-G-A-A-T-T-C-G-A-G … 3’ 3‘ … C-G-A-C-T-T-A-A