胶体金法生产工艺规程.docx

精品文档 精品文档 PAGE PAGE16 精品文档 PAGE 适用范围 适用于乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂盒（胶体金法）的生产和质量控制。 职责 研发部：制定本规程。生产管理部：执行本规程 质量管理部：按本规程执行，监督本规程的执行情况。 内容 3.1.依据 《乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂（胶体金法） 》产品标准 3.2.产品名称、剂型、规格 3.2.1 名称： 商品名：乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂（胶体金法） （2）英文名：Diagnostic Kit for Antibody toHepatitis BSurfaceAntigen(Colloidal GoldImmunochromatagraphicAssay) （3）汉语拼音名：YixingGanyanBingduBiaomianKangtiJianceShiji （jiaotijinFa ） 3.2.2.类型：三类6840体外诊断试剂。 3.2.3.规格：100T/盒(25T/筒*4筒)（无卡）；25袋/盒（1支/袋）、50袋/盒（1支/袋） 3.3.产品概述 乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂（胶体金法）采用胶体金免疫层析分析原理、双抗原 夹心法，在玻璃纤维纸上预包埋金标记重组乙型肝炎病毒表面抗原，在硝酸纤维素膜上检 测线（T）和质控线（C）分别包被重组的乙型肝炎病毒表面抗原和羊抗兔 IgG。当检测样本 为阳性时，样本中的乙肝病毒表面抗体与胶体金标记的重组乙肝病毒表面抗原结合形成复 合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线（ T）时与预包被的重组乙肝表面 抗原反应，形成免疫复合物而显现红色条带，游离金标记的兔 IgG则在质控线（C）与羊抗 兔IgG结合显现红色条带。阴性样本则仅在质控线（ C）显色。 3.4.试剂盒组成、储存、有效期 3.4.1.试剂盒组成： 100T/盒 25袋/盒（1支/袋） 50袋/盒（1支/袋） 组件 装量 数量 装量 数量 装量 数量 试纸条 25条/筒 4筒 无 无 无 无 试纸卡 无 无 1支/袋 25袋 1支/袋 50袋 样品稀释液 2ml 4瓶 2ml 1瓶 2ml 2瓶 说明书 1份 1份 1份 1份 1份 1份 3.4.2 储存条件：2-30℃保存。 3.4.3.有效期：24个月。 3.5.生产工艺流程图文件末（ 23页）。 3.6.生产工艺过程及工艺条件 根据以下各配方，按各相关试剂配制作业指导书进行配制。 （1） （2） （3） 原料名称 用量 原料名称 用量 按照 装作 原料名称 用量 书》， 配制环境： 规格 配制环境： 求进 配制环境： 分装 格+ 附加量。如下表所示（单位：ml/瓶）： 标示量 附加量 装量 15ml 0ml 15ml 3.6.3 胶体金制备 原料名称 用量 烧金溶液A 烧金溶液B 超纯水  《液体分 业 指导 根据相应 的装量要 行分装， 量 ＝规 制备环境：金标车间配料间（十万级洁净区） （1）量取 ml 超纯水到适当大小的烧瓶中； （2）量取 ml 烧金溶液A并加入烧瓶中； （3）水沸腾后，加入已经平衡的烧金溶液 B ml； （4）水继续沸腾5分钟关闭加热搅拌器，并将烧瓶移至桌面，用铝箔纸盖住瓶口，让 胶体金自然冷却。 （5）胶体金的储存：2～8℃；有效期6个月。 2 CO液，混匀后，快速搅拌中加入相应量的乙肝抗原或兔 IgG(乙肝抗原和兔IgG分开标记)， 3 混合均匀后，反应30分钟。 ℃，有效期6个月。 3.6.5铺金液配制 用工作液将1/10体积的乙肝病毒表面抗原金标记物沉淀放大 10倍；兔IgG金标记物沉淀 按1/3乙肝病毒表面抗原沉淀的量，加至上述乙肝金标工作液中（即兔 IgG金标记物沉淀 为乙肝的1/3） 按0.2mg/ml的量加入抗RBC到铺金液中； 3.6.6 小样试验：在铺金和划膜之前，应首先将待铺的基因重组抗原 -胶体金复合物溶液， 先铺一条玻纤（6mm×310mm）上，用配好的质控线液、检测线液划膜一张，与其他组分组合在一起，进行检测，要求： 阴性参考品符合率：20份阴性参考品符合率（-/-）应为20/20。 灵敏度：灵敏度参考血清，呈阳性反应。 精密性：连续重复测定精密性参考品 10次，反应结果应均为阳性，且显色度均一。 3.6.7 铺金 按每张玻纤可以铺金 36ml计算金标液的体积 ℃干燥18～24小时，如不立即使用，加干燥剂铝箔袋封存。 保存过程中严格防潮，以后打开和使用一定要在 30%湿度以下。 按照《划膜机标准操作规程》，以“252”泵速（对应速度 2.7ul/cm），将质控线液和检 测线液均匀地划在膜上，质控线划在距膜顶端 12.1±0.1cm处，检测线划在距膜顶端 12.5cm ±0.1cm处，质控线与检测线相距 5mm±1mm。 ℃干燥18～24小