卵磷脂的提取和鉴定.pptVIP

由于各种物质的结构和性质的不同，其在吸附剂表面的吸附能力各异。吸附力大的易被吸附剂吸附，而较难被展层剂所解吸。吸附力小的则不易被吸附剂吸附，而易被展层剂携带至较远的距离。这样，各种物质在吸附剂和展层剂之间反复多次的被吸附与解吸附，就表现出不同的迁移率而得以分离，并可以通过与显色剂的显色反应而得到鉴定与区分。;（一）卵磷脂的提取和纯化 1、实验材料：鸡蛋黄 2、仪器：恒温水浴锅 蒸发皿 漏斗 磁力搅拌器 天平 3、试剂： 95％乙醇 乙醚 丙酮;1、实验材料：提取的卵磷脂 2、仪 器： 电热鼓风干燥箱、 层析玻璃板、 层析 缸、吹风机、小型喷雾器 。 3、试 剂： （1）硅胶-G； （2）0. 2%羧甲基纤维素钠溶液； （3）展层剂 ：氯仿∶甲醇∶水(65∶25∶4) ； （4）显色剂：1% 碘液。;1、卵磷脂的粗提 蛋黄10g放入洁净的带塞三角瓶中，加入95%乙醇40ml，搅拌15min后，静置15min；然后加入10ml的乙醚，搅拌15 min后，静置15min；过滤；滤渣进行二次提取，加入乙醇与乙醚(体积比为3：1)的混合液30ml，搅拌、静置一定时间；第二次过滤，合并二次滤液，加热浓缩至少量，加入一定量丙酮除杂，卵磷脂即沉淀出来，即得到卵磷脂粗品。 ; 2．卵磷脂的纯化 取一定量的卵磷脂粗品，用无水乙醇溶解，得到约10% 的乙醇粗提液，加入相当于卵磷脂质量的10% 的ZnCl2水溶液，室温搅拌0.5h；分离沉淀物，加入适量冰丙酮（4℃）洗涤，搅拌1h，再用丙酮反复研洗，直到丙酮洗液为近无色止，得到白色腊状的精卵磷脂；干燥；称重。;（二）卵磷脂的薄层层析;5、点样：样点距玻璃板一端下缘1cm ，相互间隔1～1.2 cm ；每位点重复点五次，每次用冷风吹干后再点，每次点样直径不超过2mm 。 6、展层：在层析缸中加入展层剂0.5cm深，加盖平衡30分钟，将点样端浸入，密闭展层10-30min。后取出薄层板，标出展层剂前沿位置，用电吹风热风将薄层板吹干。 7、显色：用喷雾器向薄层板上均匀喷洒1%碘液溶液，热风吹干至色斑显现。;;;;五、实验结果;O;六、思考题： ;