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专题15 基因工程与细胞工程专练
1.在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kan)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞
才能在卡那霉素培养基上生长。如图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答下列问题:
(1)A 过程需要的酶有________和________________。
(2)要把重组质粒导入土壤农杆菌,首先必须用________处理土壤农杆菌,使土壤农杆菌转变为________态;
然后将__________________在缓冲液中混合培养完成转化过程。
(3)含有重组质粒的土壤农杆菌侵染离体棉花叶片组织后,将离体棉花叶片组织培养成再生植株要经过
C____________和E____________。如果要确保再生植株中含有抗虫基因,可在C 过程的培养基中加入
________________________________________。
(4)目的基因能否在棉花植株体内维持和表达其遗传特性的关键是_______________。
这需要通过检测才能知道,检测采用的方法是_____________________。
2.抗凝血酶Ⅲ蛋白是一种血浆糖蛋白,临床上主要用于血液性疾病的治疗。凝乳酶是奶酪生产中的关键性
酶。下列是生产这两种酶的相关思路,请回答下列问题:
(1)图1为通过培育转基因奶牛获得抗凝血酶Ⅲ蛋白的流程。
①图中过程a 指的是利用________法将目的基因导入受精卵,受体细胞不选用体细胞的理由是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
②在胚胎移植前,需进行____________,目的是确定要培育的个体能产奶。
③可采用________法来鉴定牛奶中是否含有抗凝血酶Ⅲ蛋白。
(2)从牛胃液中分离得到的凝乳酶以其催化能力强而被广泛应用,研究人员运用基因工程技术,将编码该酶
的基因转移到了微生物细胞中。
①从牛胃细胞中提取mRNA,再通过________形成cDNA。以此cDNA 为模板通过PCR 扩增目的基因,有
时需要在引物的5′端设计________(填“限制酶”、“DNA 连接酶”或“RNA 聚合酶”)识别序列,以便构建重组
DNA 分子。
②为提高重组DNA 分子的比例,在构建重组DNA 分子(如图2 所示)时最好选用______________作限制酶。
1
③经研究发现,如果将该凝乳酶的第20 位和24 位氨基酸变为半胱氨酸,则其催化能力将提高2 倍。现已
知通过蛋白质工程可生产高效凝乳酶,请写出有关制备步骤:
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
3.如图所示为动物细胞培养过程中,动物细胞增殖情况的变化曲线(图中B、D 两点表示经筛选后继续培养),
请据图回答下面的问题:
(1)OA 段的培养称为________培养,AB 段可能发生了________现象,需要用________酶处理,以使组织
细胞分散开来。
(2)动物细胞培养和植物组织培养过程中,就细胞增殖、分化来说,动植物细胞都要进行________________,
不同的是植物细胞还要进行________________________________。
(3)为制备单克隆抗体,需将________注射到小鼠体内,以此获取________细胞,同时可选取图中________
点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞,所选取细胞的细胞膜上的________比正常细胞显著减少。为筛选出
能够产生单克隆抗体的杂交瘤细胞,可用________培养基达到目的。
4.我
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