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第三章可移动的遗传因子 第三章 可移动的遗传因子 和染色体外的遗传因子 主要内容： 转座子概念及结构特征 (掌握) 转座子机制(了解) 质粒的概念及分类(掌握) 质粒的 用途(熟悉) 遗传重组的生物学效应(了解) 第一节 转座子 一.转位因子 转位因子（transposable element） 即可移动的基因成分（可移动基因，mobile gene ），是指能够在一个DNA分子内部或两上DNA分子之间移动的DNA片段。在细菌中指在质粒和染色体之间或在质粒和质粒之间移动的DNA片段（文献上有时形象地称其为是跳跃基因，jumping gene）。转位也是DNA重组的一种形式。 跳跃基因最早由美国冷泉港实验室（cold spring Harbor Laboratory）的女科学家B.MClintock于上个世纪40年代晚期在玉米中首次发现的。60年代，为J.A.Shapirc研究大肠杆菌高效突变实验证实。1983年荣获诺贝尔生物学医学奖。 （一）转位因子的种类及特征 细菌的转位因子包插入序列，转座子及可转座的噬菌体。 1.插入序列（insertion sequence,IS） TS Transpcsase gene TS IR IR TS target site靶位点 Transposase gene 转位酶基因 IR inverted repeated 反向（倒转重复顺序） IS的形体图 插入序列不含有任何宿主基因，它们是细菌染色体或质粒DNA的正常组成部分，一个细菌细胞常带有少于10个IS序列。 IS序列都是可以独立存在的单元，带有介导自身移动的蛋白。 （1）IS是一类较小的转位因子，长度约700-2000bp，按发现顺序IS1、IS2…命名， 只携带转移的必需基因，不含有其它偏码蛋白质结构基因，本身没有表型效应。 （2）IS两侧为反向（倒转）重复顺序（16-41bp），中间为转位酶基因，在插入新的位点侧有3~116p顺向重复顺序（directw repeated sequencedk）,DR是靶位点序列复制的产物。 （3）IS到处活动，可以插入到E.coli染色体的各个位置上，也可以插入到质粒和某些噬菌体基因组上，甚至同一基因不同位点上。这种插入作用可以双向进行，可以是正向，也可以是反向插入IS这种移动方式称为转位作用（transposition）。 （4）在一个世代的107细菌中有1次插入。 *TR（反向倒转重复序列）：GGAAGGT、、、ACCTTC CTTCCA、、、TGGAAGG *DR（正同向重复序列）：TACGTTACGT 2.转座子（transposon,Tn） 转座子是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。 (1)Tn是一类较大的可移动成分，除mobile gene外，尚含有其它基因，如抗药基因等。Tn是在研究抗药基因中发现的，由此知道抗药基因可在质粒之间，质粒与染色体之间或质粒与可转座的噬菌体之间来回移动，Tn的转位原理和Is基本相同，转位频率为10-3~10-6/拷贝。 (2)根据结构特征的不同，Tn可以分为2个亚类： ① 是一类带有抗药性基因(或其他宿主基因)的转座子，两侧是两个相同或高度同源的IS序列，表明IS序列插入到某个功能基因两端时就可能产生复合式转座子。 一旦形成复合转座子，IS序列就不能再单独移动，因为它们的功能被修饰了。 IS1 Structural gene IS1 ② TnA:数个结构基因（mob、mdr等）十IR组成。 TnA家族：没有IS序列，体积庞大(5000bp以上) 这类转座子带有3个基因，中间结构基因编码bata-内酰胺酶，两侧是38bp的倒置重复序列。 Structural gene IR IR 3.可转座的噬菌体（transposable phage） (1)包括Mu和D108两种噬菌体，是一类温和噬菌体*。 (2)感染细菌后，可以整合到细菌染色体中，插入位点是随机的（而入phage插入位点是专一的），可以插到结构基因内部，引起突变，Mu即Mutator(突变子)因此得名。 (3)插入部位的2侧有短的DR，插入时，一个拷贝留在原位，新合成的拷贝插入新的部位。 (4)和IS，Tn相比，Mu末端不含IR，这是可转座成分的一个例外。 (二)转位作用的机理 1.复制性转位机理 共联体生成和解离，靶序列的切割与复制。 2.非复制型转位作用 转位将供体DNA转座因子两侧各切断一条单链并与靶序列的两个游离末端连接