动物胚胎移植技术及体外受精.pptVIP

第四章动物胚胎工程技术及体外受精 ;动物胚胎移植技术及体外受精;现代生物技术;第一节 胚胎工程技术 胚胎移植 胚胎融合 胚胎分割 胚胎的冷冻保存 早期胚胎培养 胚细胞核移植;动物胚胎移植技术及体外受精;受精过程 ①分解放射冠 的卵泡细胞； ②水解局部透明带； ③ 精子细胞核和部分胞质进入卵母细胞。;动物胚胎移植技术及体外受精;动物胚胎移植技术及体外受精;卵裂及胚泡形成（第一周） 卵裂(cleavage) 受精卵由输卵管向子宫方向运行，并不断进行细???分裂，受精卵早期的细胞分裂称卵裂；卵裂产生的子细胞呈球形，称卵裂球（blastomere）。;胚泡形成 受精后第4~6天桑椹胚细胞继续分裂，细胞间开始出现小腔隙，并逐渐汇合成一个大腔，桑椹胚转变为中空的泡状，称胚泡（blastocyst）。胚泡由三部分组成： 胚泡 ;一、胚胎移植;初始阶段 1890-1900 W.Heape将安哥拉兔和荷兰兔的受精卵分别移植到比利时兔的输卵管内，分别获得仔兔2只 1900-1950 主要由英美科学家在家兔、绵羊、山羊小家畜方面研究，成功率35%左右 发展阶段 1950-1970 日本首次在牛胚胎移植上成功，之后日、美采用非手术法移植成功，胚胎移植成功率达70-80%;实用化初始阶段 1970-1980 加美开始成立牛胚胎移植公司，1973年牛冻胚移植成功（英） 实用化研究阶段 1982- 大规模胚胎移植、核移植、嵌合体、胚胎分割、性别鉴定、体外受精在英美日德广泛开展，克隆羊诞生;动物胚胎移植技术及体外受精;1.胚胎移植的生理学基础;2. 胚胎移植的基本原则;3、胚胎移植;1）供受体的选择与管理;受体的选择 身体健康，身体状况中上的适繁未孕个体，无生殖道疾病和难产病史 繁殖状况正常，有正常的发情周期 母性良好：泌乳性能、护仔性能 供、受的管理 防疫、记录 饲养管理等;2）、超数排卵;个体对超排处理的反应效果难以预测； 产生不良的后果：胚胎死亡 卵母细胞蛋白质合成过程发生改变 生殖道机能产生影响 ; 3）同期发情（synchronization of eatrus） 采用激素或类激素的药物处理，使这一群母畜在特定时间内集中发情和排卵。 即将母畜的黄体期延长或缩短，使母畜摆脱内、外孕激素对卵巢的控制，在同一时间内引起全部母畜的卵泡发育，从而达到同期发情的目的。;延长黄体期：孕激素 控制卵泡的生长发育和发情表现 缩短黄体期：前列腺素 加速黄体??化，使卵巢提前摆脱体内孕激素的控制 促进卵泡发育、排卵：促性腺激素 ;羊同期发情——放栓;供体超排处理;供体配种;4）胚胎回收;动物胚胎移植技术及体外受精;移胚;5）胚胎检查;;胚胎质量评价：;6天收集的胚胎（未拣）;二细胞至四细胞胚胎;胚胎的降温：使胚胎停止发育，延长其体外生存时间 体外培养：将胚胎置于体温条件下，在培养液中，使其继续发育 胚胎冷冻：通过一定的处理程序，将胚胎降温冷冻后，保存于液氮中;胚胎冷冻的原理;受精卵移植 一般供体为良种或优良个体，而受体为生产性能较差的个体或品种。 “借劣质动物之腹怀优秀个体之胎”;动物胚胎移植技术及体外受精;动物胚胎移植技术及体外受精;动物胚胎移植技术及体外受精;选择; 6)胚胎移植的应用范围;在家畜改良方面的应用;在特定品种扩繁上的应用;在动物生物多样性上的应用;其它方面应用;二、胚胎分割技术;.怎么分割;.工具;.半裸胚直接到受体;.还存在什么问题;.切什么时期;3）胚胎分割的理论依据;4）.特点: 后代具有相同的遗传物质. 胚胎克隆. 5）.使用的主要仪器： 实体显微镜和显微操作仪 6）.应用: 为转基因技术、性别控制技术提供活胚材料 ;注意： ①对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要将内细胞团均等分割。 原因：内细胞团一般到囊胚阶段才出现，它是发育为胚胎本身的基础细胞，其他细胞为滋养细胞，只为胚胎和胎儿发育提供营养。若分割时不能将内细胞团均等分割，会出现含内细胞团多的部分正常发育的能力强，少的部分发育受阻或发育不良，甚至不能发育等问题。;②胚胎分割技术也是动物克隆的方法之一 ; 三、胚胎细胞核移植 将未着床的早期胚胎分散成单个的细胞，用电融合方法，使单个细胞与去除细胞核的未受精的成熟的卵母细胞融合。体外培养发育成胚胎后，移入受体妊娠产子。 已在小鼠、兔、山羊、牛、猴等动物上成功。;四、性别控制与胚胎性别鉴定; 早期胚胎的性别鉴定 1）、核型分析：分析部分胚胎细胞的染色体的组成 2）、SRY片段