之微生物菌种选育.ppt

第二章 微生物菌种选育;Contents;第一节 菌种的来源;细菌;酵母菌;霉菌;二、工业微生物来源;三、微生物菌种的选择性分离;;微生物样品的富集培养;目的菌种的分离;平板划线法;1.稀释平皿分离法;b.倾注平皿分离法;用刚果红染色法鉴定筛选降解纤维素的菌株 ;;;抗生素产生菌的筛选;抑菌圈法;生长因子产生菌的筛选;;菌种改良;一、自然选育;诱变育种;诱变育种的原理;;诱变育种的一般步骤;诱变育种步骤;;;;;;;;筛选营养缺陷型的步骤;一、诱变方法;;; (一)影印法; (二)点种法; (三)夹层法;四、营养缺陷型的鉴定;（1）氨基酸、维生素、核酸碱基三大类营养缺陷的鉴定;（2）单一氨基酸营养缺陷的确定;;;生长圈位置;原理：抗反馈阻遏和抗反馈抑制突变株都是由于代谢失调所造成的，在细胞中已经有大量最终代谢产物时仍然继续不断地合成这一产物。 ;;3）抗性突变菌株的筛选 ;抗性突变菌株的筛选方法 ; 阶梯性筛选法 ;;三、杂交育种;接合;DNA的转化 ;转导 ;准性生殖;四、原生质体融合;;五、基因工程育种;第三节 菌种的退化和菌种的保藏;一、菌种退化;（一）引起菌种退化的原因;（二）菌种的复壮;菌种的复壮措施;1）合理的育种；2）控制传代次数（一般在DNA的复制过程中，碱基的错 配率是5x10-4，自发突变的频率为10-8~10-9，采用良好的菌种保藏方法，可以减少移种和传代的数）；3）选择合适的培养条件；4）采用不同类型的细胞进行传代（对丝状微生物而言，通常采用稳定的单核孢子进行接种）；5）采用有效的菌种保藏方法。;1. 目的：①存活，不丢失，不污染 ②防止优良性状丧失 ③随时为生产、科研提供优良菌种2. 原理：选用优良的纯种，（最好是休眠体，如分生孢子、芽胞等），创造降低微生物代谢活动强度，生长繁殖受抑制，难以发生突变的环境条件。（其环境要素是干燥、低温、缺氧、缺营养 以及添加保护剂等）。; 菌 连续在培养基上（内）移种 种 生活态 传代培养保藏法 连续在活宿主上（内）移种 保 固体斜面 藏 湿法 半固体琼脂柱 方 休眠态 液体介质（蒸馏水、糖液、其它溶液） 法 干法 藏在玻璃管内 吸附在合适的载体上;④真空冷冻干燥法 加有保护剂的菌悬液在冻结状态下予以真空干燥。 适用于各种微生物，便于大量保藏，菌种存活时间长，是目前最好的保藏方法。 ⑤液氮超低温保藏法 将菌种置于保护剂中，预冻后保存在液氮超低温冰箱中（ -196℃）。 适用于各种微生物的较理想的保藏方法。 ;菌种保藏机构的任务：广泛收集科研和生产菌种、菌株，并加以妥善保管，使之达到不死、不衰、不乱以及便于研究、交换和使用的目的。 菌种保藏机构： 中国微生物菌种保藏委员会(CCCCM) 美国的典型菌种保藏中心(ATCC) 英国国家典型菌种保藏所（NCTC） 法国里昂巴斯德研究所（IPL） ;几种常用菌种保藏方法的比较