分析化学高效液相色谱仪13-5HPLC-色谱仪.pptxVIP

§5 高效液相色谱仪 输液系统进样系统分离系统检测系统数据记录处理系统组成：山东医学高等专科学校药学系高效液相色谱仪示意图在线检测进样口混合器高压泵色谱图色谱柱检测器高灵敏检测器高效固定相溶剂山东医学高等专科学校药学系一、输液系统 （一）高压输液泵性能：流量精度高且稳定流量范围宽且可调能在高压下连续工作液缸容积小密封性能好，耐腐蚀山东医学高等专科学校药学系 柱塞往复泵结构示意图1. 转动凸轮2. 柱塞 3. 密封垫 4. 液缸 5.入口单向阀6. 出口单向阀7. 流动相入口8. 流动相出口山东医学高等专科学校药学系单向阀阻尼器泵1泵2串联式柱塞往复泵示意图山东医学高等专科学校药学系（二）梯度洗脱装置 洗脱方式：等强度洗脱 在同一分析周期内流动相的组成保持恒定，适合于组分数目少，性质差别小的试样。山东医学高等专科学校药学系梯度洗脱 在一个分析周期内，程序控制改变流动相的组成，如溶剂的极性、离子强度、pH值等。分析组分数目多、性质差别大的复杂试样。山东医学高等专科学校药学系二、进样系统 对进样器的要求：密封性好死体积小重复性好进样时对色谱系统的压力、流量影响小山东医学高等专科学校药学系进样器1）进样阀（六通阀），常用带有定量管的六通阀2）自动进样装置山东医学高等专科学校药学系进样位置(inject)充样位置（load)废液废液至色谱柱 至色谱柱来自泵来自泵六通阀进样示意图 山东医学高等专科学校药学系自动进样装置山东医学高等专科学校药学系三、分离系统 组成：柱管+固定相作用：分离可重复使用实验结束，要用经过过滤和脱气的适当溶剂冲洗色谱系统山东医学高等专科学校药学系四、检测系统 对检测器的要求：灵敏度高（检测限低）噪音低线性范围宽重复性好适用范围广（通用型、专属型）山东医学高等专科学校药学系（一）紫外检测器(UVD)检测原理：A=KcL特点：紫外检测器的灵敏度、精密度及线性范围好，不易受温度和流速的影响，可用于梯度洗脱。 山东医学高等专科学校药学系（一）紫外检测器(UVD)局限：只能检测有紫外吸收的物质，流动相的截止波长应小于检测波长。 为专属浓度型检测器。山东医学高等专科学校药学系（二）荧光检测器（FD）检测原理：发射荧光A=KcL特点：选择性好，灵敏度比紫外检测器高（检测限10-10 g/ml）为专属型检测器山东医学高等专科学校药学系（三）示差折光检测器（RID） 检测原理：利用样品池和参比池之间折光率的差别来对组分进行检测，测得折光率差值与样品组分浓度成正比。为通用型检测器山东医学高等专科学校药学系（三）示差折光检测器（RID） 其主要缺点是折光率受温度影响较大，且检测灵敏度较低，不能用于梯度洗脱山东医学高等专科学校药学系（四）蒸发光散射检测器（ELSD） 检测原理：样品组分在蒸发室内形成气溶胶后进入检测室。用强光或激光照射气溶胶而产生散射，测定散射光强而获得组分的浓度信号。为通用型检测器。山东医学高等专科学校药学系（五）安培检测器 检测原理：利用组分在氧化还原过程中产生的电流或电压变化来对样品进行检测。只适于测定具有氧化还原活性的物质。为电化学检测器。山东医学高等专科学校药学系五、数据记录及处理系统 微机采集和分析色谱数据：给出峰宽、峰高、峰面积、对称因子、分离度等色谱参数。 复杂的试样，需要“色谱专家系统”。 山东医学高等专科学校药学系六、高效液相色谱仪的主要性能指标1）流量精度 2）噪音 3）漂移 4）检测限 5）定性与定量重复性 山东医学高等专科学校药学系