疫苗生物技术.pptVIP

疫苗生物技术;英国医生爱德华.詹纳（1749-1823）研究天花疫苗（牛痘）的过程;天花病人局部痂皮;2.为了根绝可怕的天花，詹纳决心寻找更有效的办法。通过广泛的调查，发现两种人不会得天花：一种是患过天花的人；另一种是养牛场的挤牛奶女工.;3.这时，詹纳 的调查重点放 在挤奶女工的身上;４、患过牛痘的人 能产生对天花的 抵抗能力;5.为了检验猜想,他用实验来证实;实验证实了他的假设是正确的，同时表明，患过牛痘的人体内产生了能抵抗天花病毒的抗体;疫苗发展的三个时期;*减毒疫苗的发明 19 世纪末，随着微生物学的发展，法国免疫学家巴斯德（Pasteur）和德国细菌学家郭霍（Koch）在创立了细菌分离培养技术的基础上，通过系统地科学研究，利用物理、化学，以及生物学方法获得了减毒菌苗，并用于疾病的预防和治疗。 Pasteur 以高温培养法制备了炭疽疫苗，用狂犬病毒在兔体内经连续传代制备了狂犬病疫苗。这些减毒疫苗的发明不但为实验免疫学打下了基础，也为疫苗的发展开辟了新局面。 ;牛分支杆菌F Mycobacterium bovis ;一、疫苗的基本成分、生理作用基础和特征;1.抗原(antigen);抗原引起的体液免疫;多糖、脂类和核酸等抗原可直接诱导B淋巴细胞产生IgM抗体，但无法诱导T淋巴细胞辅助，因此无法产生亲和突变的抗体反应和记忆型B淋巴细胞。 这类抗原的主要特点是具有由相同的单体聚合形成的多聚性抗原，它们能同时与B细胞表面多个抗原受体交连，因此能在没有T细胞辅助下直接激活B淋巴细胞，但至今还不清楚B淋巴细胞对这类抗原的反应是否还需要其他信号。此类抗原也称胸腺非依赖型抗原。与蛋白抗原相比，此类抗原引起的免疫反应较弱，记忆期也相对较短。 ;影响抗原免疫原性因素;2、抗原与机体的相互作用 （一） 异物性： “异物”的概念定义为“在胚胎期未与淋巴细胞充分接触过的物质” （二） 进入机体的途径：皮内、皮下、肌肉、腹腔(仅限于动物)、静脉 (三）机体遗传因素：个体对抗原刺激产生应答的能力受遗传因素控制 ;抗原引起的细胞免疫反应;2、佐剂;（二）佐剂的作用机制：①改变抗原的物理性状，延缓抗原降解和排除，从而更有效地刺???免疫系统；②刺激单核/巨噬细胞系统，增强其处理和递呈抗原的能力；③刺激淋巴细胞增殖与分化。 （三）佐剂的应用：①增强特异性免疫应答，用于预防接种及制备动物抗血清；②作为非特异性免疫增强剂，用于抗肿瘤与抗感染的辅助治疗。 ;佐剂;植物来源佐剂;细菌来源佐剂;细胞因子;人工合成佐剂;防腐剂;稳定剂、灭活剂及其他相关成分;二、疫苗设计的技术基础;1、疫苗设计的生物学基础;B细胞表面的CD40分子与T淋巴细胞和树突状细胞表面的CD40L分子的相互作用是B细胞激活和分化所必须的条件。 活B淋巴细胞至少需要两个信号：第一个信号是B淋巴细胞表面抗原受体的交连，第二个信号则是B淋巴细胞表面所表达的CD40分子和CD4T辅助细胞表面CD40L分子的相互作用。 T辅助细胞所分泌的细胞因子，如白介素2、白介素4、白介素5、干扰素和肿瘤坏死因子等对B淋巴细胞的激活也有重要作用。 记忆型B淋巴细胞是在淋巴组织的生发中心形成的。在记忆型B淋巴细胞的形成过程中，B淋巴细胞膜上的CD40分子起着关键的作用。 ;幼稚T细胞受到抗原递呈细胞（APC）的激活后，迅速增殖，分化出大量特异性效应细胞，实现免疫反应。反应结束后，大部分效应细胞程序性死亡，部分细胞转化为记忆性T细胞长期存在。 记忆性细胞在体内高质量存在，必须有一动态的自我平衡过程。在不同的信号刺激下，自我更新，才能保证记忆细胞长期存活。 抗原存在的持续过程可能是记忆细胞产生的一个重要因素，那些在反应终结注定要被清除的细胞可能就是那些执行了持续反应反应的后代，它们以较高强度接触抗原的过程即是启动了死亡旁路的过程。相反，在接近反应后期的那些细胞，短暂的接触抗原可能已可以使这些细胞增殖并分化成为效应细胞，但都不足以启动各种死亡旁路。因些，它们不象其他效应细胞那样在感染终结后被清除，而是作为记忆细胞长期存活下去。;记忆的基本过程对疫苗设计提出了较有意义的技术挑战，在设计一种疫苗时，能够在免疫应答的后期，以相应的技术减少效应细胞的死亡，就有可能增加记忆细胞的数量，而以后的二次免疫应答，就可能因为较多的产生记忆细胞存在而得以更好地发挥作用。;2、疫苗设计的安全要求;避免规划失误的基本原则包括：;3、体液免疫或细胞免疫的设计考虑;4、疫苗设计中B细胞、T细胞表位的选择;B细胞表位的选择;模拟表位(mimotope);T细胞表位的预测、筛选、分析 ;传统的T细胞表位预测采用“重叠肽”法，即在体外合成与整个蛋白抗原序列相重叠的系列多肽，进行体外细胞毒或增殖等免疫刺激能力试验，分析一定基序短肽的免疫原性，此