第二章紫外可见分光光度法.pptVIP

第二章紫外可见分光光度法 苯有三个吸收带，均由???*跃迁引起。 苯环的三个吸收带是由苯环结构中三个乙烯的环状共轭系统的跃迁所产生的，是芳香族化合物的特征吸收。 4.苯及其衍生物 苯环中6个P电子在形成大?键时产生三个成键分子轨道和三个反键分子轨道。形成三个吸收带，分别为E1、B、E2。 第二章紫外可见分光光度法 因此常用B吸收带的精细结构来识别芳香族化合物。但在极性溶剂中或有取代基与苯环共轭时，精细结构变弱且模糊甚至消失。 四.溶剂对紫外吸收光谱的影响 即所谓的溶剂效应，溶剂的极性会影响吸收的强度及波长大小。主要表现在两个方面： 1.带有孤对电子的分子能与极性溶剂形成氢键； 使R带(n??*)蓝移。 第二章紫外可见分光光度法 2.极性溶剂的偶极子和待测分子的偶极子相互作 用，使?电子活性减小, ???*跃迁能量变小， K带(???*)发生红移。 此外溶剂极性也影响吸收光谱的精细结构。所以在选择紫外吸收光谱曲线时，应注意几点： (1)尽量选用低极性溶剂； (2)对样品的溶解度大，形成的溶液具有良好的 化学和光化学稳定性。 (3)溶剂在样品的吸收光谱区无明显吸收。 第二章紫外可见分光光度法 五.紫外分光光度法的应用 1.定性分析 紫外光谱分析比可见光谱分析更具有一些突出的特点，每类化合物都有自己的特征吸收带。可据此对紫外区有吸收峰的物质进行结构分析。 但要注意在紫外区没有吸收带的有机物或其物质组成的变化不会显著影响其吸收光谱的不能应用。 第二章紫外可见分光光度法 光度计中，透光率的标尺刻度呈均匀分布，而吸光度A=-lgT，∴导致A的标尺刻度分布是不均匀的。 A=-lgT T=100%， A=0 T=10%， A=1.0 T=0%， A=∞ 第二章紫外可见分光光度法 对于同一台仪器，读数的波动对透光率来说，基本上为一定值，但由于A的标尺刻度不是均匀的，所以A的读数波动不为定值；根据标尺可知，A?，读数波动引起的误差?，因此选择合适的吸光度范围，可减小测量结果的误差。 据L-B定律, A=-lgT=?bc 微分得到: 得到: 第二章紫外可见分光光度法 要使测定结果(?c/c)的相对误差最小，对上式求导应有一极小值。即： 得： A=-lgT=0.4343 或T=36.8% 说明当 A=0.4343时，得到浓度误差最小。 通过作图(?c/c-T)可进一步了解吸光度测量对结果测量的误差关系。 第二章紫外可见分光光度法 当透光度为15%~65% (吸光度0.2~0.8)时,浓度测量的相对偏差较小;此即分光光度分析中比较适宜的吸光度测量范围. 二.测量条件的选择 为使测定结果有较高的灵敏度和准确度，必须注意选择适当的测量条件。主要有以下几点： 第二章紫外可见分光光度法 1.入射光波长的选择 选择的原则：一般以被测物质的最大吸收波长作为入射光，即所谓的最大吸收原则。在此波长下测定，不仅灵敏度较高，而且测定时偏离L-B定律的程度减小(如前所述)，准确度较高。 如果共存干扰物质在?max处也有吸收，应选择待测物有吸收而干扰物无吸收的波长作入射光。即所谓的“吸收最大，干扰最小”的原则。 第二章紫外可见分光光度法 如图，a表示丁二酮肟镍的吸收曲线；b表示酒石酸铁的吸收曲线； 用丁二酮肟显色测定 钢中的镍，其最大吸收波 长在470nm左右；试样中的铁用酒石酸钾掩蔽,在同样波长下，也有吸收，对测定有干扰。 从图可知，当波长大于500nm时，干扰变小，所以测定时，可将入射光波长选在500nm以上。虽然灵敏度有所降低，但可消除干扰。 第二章紫外可见分光光度法 2.控制适当的吸光度范围 由以上讨论的光度测量误差中得知，为使测量结果的误差尽可能小，一般应控制标准溶液的吸光度在0.2~0.8范围内。从 A=?bc 的公式中可知，控制A值大小可从两个方面进行，一是调节b值；二是改变浓度c。 3.选择适当的参比溶液 在测量吸光度A时，利用参比溶液调节仪器零点，可消除溶液中其它成份以及吸收池、溶剂对光的反射和吸收所带来的误差。 第二章紫外可见分光光度法 如此根据试样溶液的性质，选择合适组分的参比溶液是很重要的。 (1)溶剂参比 若样品基体、试剂及显色剂均在测定波长处 无吸收，则可用溶剂作参比液(有时用蒸馏水 替代)。 (2)试样参比 若显色剂或溶剂无吸收而样品基体组分有吸 收时，则应采用不加显色剂的样品溶液作为 参比液。 第二章紫外可见分光光度法 (3)若显色剂、试剂