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- 2021-05-21 发布于广东
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高效液相色谱;1 概述;;高效液相色谱与经典液相色谱比较;(1)高柱效:由于新型高效微粒固定相填料的使用,柱效可达30000块/m理论塔板数;
(2)高灵敏度:在高效液相色谱中常使用的紫外吸收检测器的最小检测量可达10-9g,而荧光检测器的灵敏度可达10-11 g,非破坏性;
(3)分析速度快:由于使用了高压输液泵,输液压力可达40MPa,流动相流速大大加快,完成一个样品分析,仅需几分钟至几十分钟,与经典的液相色谱相比,分析时间大大缩短;
(4)高选择性:不仅可分析有机化合物的同分异构体,使用手性固定相还可分析性质上极为相似的光学异构体。;例如:
分离苯的羟基化合物,7个组分只需1min就可完成。
氨基酸分离:
经典色谱法: 20h分离出20种氨基酸(柱长约170cm,柱径0.9cm,流动相速度30cm3/h)。
高效液相色谱法:lh。
用25cm×0.46cm的Lichrosorb-ODS(5μ)的柱,梯度洗脱,0.5h内分离出尿中104个组分。;与气相色谱比较;储液器;由输液系统、进样系统、分离系统、检测系统和数据处理系统组成。;; HPLC组成
主要部分:高压输液系统、进样系统、分离系统和检测系统。
辅助装置:自动进样、馏分收集、数据处 理等。
;HPLC工作过程:
高压泵将贮液器中流动相经进样器送入色谱柱,然后从控制器的出口流出。
注入欲分离样品时
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