细胞生物学实验课件pptPowerPointPres.pptx

细胞生物学实验;实验一 血涂片的制备及细胞大小的测量;二、实验原理;三、实验用品;四、方法与步骤;采血前用70％酒精棉球消毒人的指腹;采血;由于第一滴血中含单核白细胞较多，因此弃去第一滴血。;推片：挤出第二滴血置于载玻片的右侧;再取另一张边缘光滑的双凹片，斜置于血滴的前缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开成线状。;;染色;结果显示;淋巴细胞;单核细胞;嗜中性粒细胞;嗜酸性粒细胞;嗜碱性粒细胞;;显微测微尺的使用;;目镜测微尺;使用方法;3.移动镜台测微尺,同时转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺平行靠近,并将两尺的“0”点刻度线或某刻度线对齐.然后从左向右查看两尺刻度线另一重合处,记录重合线间目镜测微尺与镜台测微尺的格数.按下式计算目镜测微尺每格等于多少微米。;;4.移去镜台测微尺，换血涂片，目镜测微尺测量细胞所占小格数X目镜测微尺每小格代表的实际长度=被测细胞的实际长度。;实验作业 ; 实验二 细 胞 凝 集 反 应 ; 二、 实验原理; ③凝集素是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一性结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果。　　④凝集素与糖分子结合有一定的专一性和结合价，并与细胞膜上受体的分布有关。 ;三、实验仪器 ;;五、实验内容与实施过程;实验内容与实施过程;实验内容与实施过程;实验作业 ;实验总结;实验总结;备注; 实验三 细胞膜的渗透性 ; 二、 实验原理;三、实验仪器 ;;五、实验内容与实施过程;实验内容与实施过程;实验内容与实施过程;实验作业 ;实验作业 ;实验总结;实验四 线粒体和液泡系的 超活染色与观察; 二、 实验原理;③詹纳斯绿B：詹纳斯绿B能专一的对线粒体进行活体染色。线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态，即有色状态，呈蓝绿色，而在周围的细胞质中染料被还原，成为无色状态;三、实验仪器 ;;五、实验内容与实施过程;实验内容与实施过程;实验内容与实施过程;实验内容与实施过程;实验作业 ;实验总结; 实验五 叶绿体的分离与荧光观察 ; 二?? 实验原理;三、实验仪器 ;;五、实验内容与实施过程;实验内容与实施过程;实验内容与实施过程;实验内容与实施过程;实验作业 ;实验总结;实验六 植物原生质体的 分离与培养 ; 二、 实验原理; ②原生质体分离纯化或融合后，在适当的培养基上应用合适的培养方法，能够再生细胞壁，并启动细胞持续分裂，直至形成细胞团，长成愈伤组织或胚状体，再分化发育成苗。其中，选择合适的培养基及培养方法是原生质体培养中最基础也是最关键的环节。 ;三、实验仪器 ;;五、实验内容与实施过程;实验内容与实施过程;④在25～28℃黑暗条件下，酶解2～3h,用200目网过滤除去未完全消化的残渣。在1000rpm条件下离心5分钟，弃上清。加入3～ 4ml 0.2mol/LCaCl2·2H2O洗液，用注射器向离心管底部缓缓注入20％蔗糖溶液6ml，在1000rpm条件下离心5—10分钟，由于密度梯度离心的作用，生活力强状态好的原生质体漂浮在20％的蔗糖与0.2mol/LCaCl2·2H2O之间，破碎的细胞残渣沉入管底。;⑤用200μl移液器轻轻将状态好的原生质体吸出(注意尽可能不要吸入下层的蔗糖溶液)，放入另一干净的离心管中．加4ml 0.2mol/LCaCl2·2H2O悬浮，1000rpm离心2～5分钟，弃上清．;⑥将收集的原生质体悬浮在适量的DPD培养基中，用血球计数板调整原生质体密度为5×104/ml（请参考细胞计数）之间。 ⑦用带皮头的移液管将原生质体悬液分装在培养皿中，每皿放5ml。 ⑧用石蜡膜带封口。置26℃左右条件下进行暗培养。;5、培养结果的观察（活力检查，细胞壁再生的观察，细胞分裂的观察）:在课外由教师指导学生进行.;实验内容与实施过程;实验的意义;实验作业 ;实验总结; 实验七 动物血细胞的 电融合技术 ; 二、 实验原理; 动物的游离细胞在电刺激下可进行细胞融合，且具有融合率高、无毒性、操作简便及融合后的细胞继续培养成活率高等特点，是细胞工程手段的又一进展。;三、实验仪器 ;;五、实验内容与实施过程;实验结果 ;实验内容与实施过程;实验作业 ;实验总结;实验总结;实验总结;备注; 实验八 利用PEG为媒介 物进行动物血细胞融合 ; 二、 实验原理; 动物的游离细胞在电刺激下可进行细胞融合，且