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项目九 血清学试验; 一、抗原(Antigen，Ag)? 能刺激机体产生特异性免疫应答，且能与其免疫应答产物(抗体或致敏淋巴细胞) 在体内或者体外结合，并发生一系列生物学效应的物质。;T细胞; （一）抗原的两种基本特性 1.免疫原性 指抗原分子能够刺激机体产生免疫应答(产生特异性抗体及免疫效应细胞)的性质。 ; 2.抗原性(又称免疫反应性) 指抗原分子与免疫应答产物(抗体或免疫效应细胞)发生特异性结合的性质。;1.抗原本身的理化性质 2.抗原与机体的相互作用（免疫方式） ;（1）异物性:非己的异物;（三） 抗原的特异性;抗原决定簇（AD）; 二、抗体(Antibody，Ab)? 机体免疫细胞被抗原激活后，由B细胞分化成熟的浆细胞合成、分泌的一类能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 ; 免疫球蛋白(immunoglobulin, Ig) (1)定义：抗体和化学结构与抗体相似的球蛋白的统称。 (2)存在形式： 膜型— B细胞膜上的抗原受体 分泌型—分泌进入血清等体液中, 介导体液免疫应答 ;;1、免疫球蛋白的分子结构;1、免疫球蛋白的分子结构;2、免疫球蛋白的生物学特征;三、补体系统;⑴细胞毒及溶菌/溶病毒作用：补体激活产生MAC，形 成穿膜的通道，导致细胞崩解。 ⑵调理作用：通过与吞噬C表面结构结合而促进其吞噬作用(抵抗全身性细菌和真菌感染的主要机制之一)。 ⑶免疫粘附作用：抗原-抗体复合物→活化补体→与补体受体阳性细胞粘附→ 将抗原-抗体复合物转移至肝、脾→巨噬C清除。 ⑷炎症介质作用- C3a/C5a→与肥大C/嗜碱粒C表面受体结合→触发靶C脱颗粒/释放组胺等介质→介导局部炎症反应。;抗体产生的一般规律;抗体产生的一般规律;血清学试验;血清学试验的一般特点;特异性;可逆性;比例性;网格学说;血清学试验的影响因素;一、反应物自身因素;抗原的理化性状、抗原决定簇的数目和种类均可影响血清学反应结果 例如，可溶性抗原与相应抗体反应出现沉淀，而颗粒性抗原与相应抗体反应则出现凝集 ;抗体是血清学反应中的关键因素，对反应的影响表现在以下三个方面: (1)来源:来自不同动物??免疫血清，其反应性有差异。家兔等大多数动物的免疫血清具有较宽的等价带，通常在抗原过量时才易出现可溶性免疫复合物;马等大动物和人的免疫血清等价带较窄，少量的抗原或抗体过剩，均可形成可溶性免疫复合物;(2)特异性与亲和力:;（3）浓度: 抗体的浓度往往是与抗原相对而言。合适的浓度才出现明显的反应现象。因此许多试验应进行抗体预滴定，找出最适反应浓度。 ;电解质: 生理盐水或缓冲液 酸碱度: pH6～pH9 温 度: 15℃～40℃，37℃最适 ;l.电解质;通常在血清学试验中，以8.5g/LNaCl溶液作为抗原抗体的稀释液及反应液，其中Na+和Cl-可分别中和胶体颗粒上的电荷，使胶体颗粒的电势下降，形成可见的沉淀物或凝集物。但如果电解质浓度过高，则会出现非特异性蛋白质沉淀，即盐析。; 2.酸碱度 合适的pH是抗原抗体反应的必要条件之一。血清学试验一般以pH6--9为宜，超出此范围可影响抗原和抗体的理化性质，导致假阳性或假阴性结果。当pH为3左右时，接近细菌抗原的等电点，可出现非特异性酸凝集，造成假象。 ; 3.温度 抗原抗体反应一般在15一40℃范围内均可进行，最适温度为37℃。在此范围内温度越高，分子运动速度加快，增加抗原抗体接触机会，反应速度越快，但亦容易引起复合物解离;温度越低，反应速度缓慢，但抗原抗体结合牢固，易于观察。某些特殊的抗原抗体反应需要特定的温度，如冷凝集素在4℃时与红细胞结合，20℃以上反而解离。;4、作用时间; 此外，抗原抗体反应在液相中反应时，适当振荡与搅拌，也可促进抗原抗体分子的接触，加速反应。 ;主要的抗原抗体反应;1、凝集反应（Agglutination);2、沉淀反应(Precipitation);3、补体结合试验(Complement fixation test ,CFT);4、中和试验(Neutralization test);1、Genius only means hard-working all ones life. (Mendeleyer, Russian Chemist)? 天才只意味着终身不懈的努力。20.8.58.5.202011:0311:03:10Aug-2011:03 2、Our destiny offers not only the cup of despair, but the chalice of oppo