植物组织培养实际科学应用技术.pptVIP

第5章 植物组织培养实际应用技术;5.1 花卉离体繁殖技术;（2）蝴蝶兰离体繁殖技术; 3）继代培养 继代培养基：B5+6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L中，培养4d后愈伤组织表面出现绿色芽点，分化成丛生芽。 4）壮苗生根培养 生根培养基1/2MS+IBA1.2mg/L+NAA0.05mg/L中培养，10d后切口基部开始长出白色的根状突起，25d后，每株生根4条以上，生根率可达到95％。; 5）驯化炼苗与移栽 移栽前5d，将试管苗转移到驯化室，2d后将封口膜打开，使幼苗完全与空气接触，避免高温和强光直接照射，3d后即可移栽。 移栽时洗除基部培养基后，将苗放在1000倍的多菌灵水溶液中浸泡1-2min，插入消毒的苔藓基质中，并用薄膜覆盖保湿。保持温度25℃，相对湿度70-80％，移栽成活率可达90％以上。;5.1.2 百合;（2）百合离体繁殖技术; 3）继代培养 将小鳞茎或不定芽转接到增殖培养基中进行继代培养，继代培养基MS+NAA0.3-0.5mg/L+BA1.0mg/L，培养条件同上。2周后，小鳞茎和不定芽分化出许多大小不等的鳞茎。 4）生根培养 将生长健壮的百合鳞茎苗分成单株，去除基部的愈伤组织后接种于生根培养基，生根培养基MS+NAA0.3-0.5mg/L或1/2MS+IBA0.2-0.5mg/L。待根长到1-2cm时，即可驯化移栽。; 5）驯化移栽与移栽 在试管苗移栽前，放在4-10℃低温条件下驯化锻炼2-3周，这样移栽后的幼苗生长更加健壮。移栽幼苗最好用消毒的腐殖土或泥炭土加蛭石的混合基质。保持移栽温度20-25℃。同时，移栽后注意湿度管理，相对湿度控制在80％-90％。还要防止烈日曝晒，后期幼苗不宜浇水过多，并及时喷洒药剂预防病虫危害。成活率可达到90％以上。;5.1.3 香石竹;（2）香石竹离体快繁技术; 3）继代培养 继代培养采用丛生芽方式进行增殖，将要进行增殖扩繁的试管苗转接到MS＋BA 0.2～0.5mg/L＋NAA 0.1～0.3mg/L继代培养基上进行培养。 4）生根培养 将高度达到2cm左右，生长正常的小芽切下，接种于1/2 MS＋NAA 0～1.0mg/L生根培养基中。; 5）驯化移栽与移栽 将生根香石竹小苗经过常规清洗后，放入800倍50%的多菌灵或甲基托布津溶液中浸泡2～3min，移栽到蛭石、河沙、腐殖土混配的基质中。;5.1.4 菊花;（2）菊花离体快繁技术; 3）继代培养 取接种3-4周的茎尖，转接到继代培养基中，经过25-30d的培养可以分化5-6个不定芽。 4）生根培养 当分化出的不定芽长达2-3cm时，单芽取下转接到生根培养基中培养，15d左右开始长根，培养10d左右根长达1-3cm,生根率达95％。; 5）驯化移栽与移栽 将根长1-2cm的菊花试管苗移入驯化室培养4-5d，打开瓶盖继续炼苗2-3d。移栽基质采用消毒的珍珠岩：糠灰=2：1。移苗后即覆盖薄膜保湿，1周后逐步揭膜通风并每天定时喷水保湿。炼苗2周后，每周喷一次营养液促进小苗生长，提高大田成活率。;5.2 树木离体繁殖技术;（2）毛白杨的离体繁殖技术; 3）继代生根培养 继代增殖培养有两种方法。 ①茎切段生芽扩大繁殖法 将由初代培养诱导出的幼芽从基部切下，转接到新配制的生根培养基上。生根培养基为MS，补加IBA0.25mg/L，盐酸硫胺素浓度提高到10mg/L，蔗糖浓度为1.5%。 ②叶切块生芽扩大繁殖法 先用茎切段法繁殖一定数量的带有6-7个叶片的小植株，截取带有2-3个展开叶的顶段仍接种到上述切段生根培养基上，作为以后获得叶外植体的来源。; 4）驯化移栽与移栽 将生根苗移至驯化室，打开瓶口炼苗，逐渐降低湿度，并逐渐增强光度，进行驯化，使新叶逐渐形成蜡质，产生表皮毛，逐渐恢复气孔功能，减少水分散失。初始光照应为日光的1/10,每3d增加10%，经过10-30d炼苗即可移入大田。湿度，开始3d饱和湿度，其后每2-3d降低5%-8%，直到与大气相同。 ;5.2.2 红叶石楠;（2）红叶石楠离体繁殖技术; 3）继代培养 无根的试管苗经30-40d培养达到3cm左右时，即可切割以扩大繁殖。当继代苗达到一定数量后，可以进行生根培养。 4）生根培养 当红叶石楠无根苗长到高2cm左右时，可单株转接到生根培养基上培养。生根培养基可用1/2MS＋NAA0.2-0.3mg/L，一般经一周左右可见红色根生成，30-40d后根长1-3cm。 ;