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植物组织培养简介 ;一、植物组织培养的定义 植物组织培养是上世纪初（20世纪20年代），以植物生理学为基础发展起来的一项技术。 植物组织培养是指在无菌条件下将离体的植物器官、组织、细胞以及原生质体，培养在人工配制的培养基上，结予适当的条件，使之长成完整植株的过程。也称之为离体培养或试管培养。（广义）;胚轴;二、植物组织培养的理论基础;;1.分化〔differentiation〕： 指细胞在分裂过程中发生结构和功能上的改变，从而在个体发育中形成各类组织和器官完成整个生活周期。;3.再分化〔redifferentiation〕: 指脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程，重新形成各类组织和器官的过程。;4.愈伤组织〔callus〕:;愈伤组织;三、当前植物组织培养研究和应用的方向 （植物组织培养的意义）;快繁方法： ◆茎尖、茎段、鳞茎盘培养产生腋芽； ◆根、叶等培养产生不定芽； ◆愈伤组织诱导产生不定芽等。;2、花药培养和细胞育种：即可进行单倍体 育种，缩短育种年限，杂种优势明显。;四、植物组织培养的特点;2、缺点 成本较高；技术要求高;五、组培实验室设计及组培常用仪器 （一）、实验室的大小：根据生产规模 的大小来定。 组培室:温室=1 :10;（二）、组培实验室的布局 ;A Glimpse of Plant Tissue Culture;准备室;（四）、常用仪器和设备;（五）、必要的器皿 玻璃器皿 1、培养器皿：如试管、三角瓶、培养皿等 2、盛装器皿：如烧杯、试剂瓶、搪瓷缸等 3、计量器皿：量筒、移液管等 4、其它：滴瓶、称量瓶、玻棒、漏斗等 ;金属器械 1、镊子、剪刀等分离接种器械 2、过滤器械 ;六、 植物组织培养的操作技术;（一）、洗涤 培养容器、用具 常用家庭用的洗衣粉、洗洁精清洗。 ;（二）、灭菌 ;1.培养基灭菌; 培养基高压蒸汽灭菌所必需的最少时间;;2.玻璃器皿灭菌;3.接种工具灭菌;◆湿热灭菌：121℃,20-30min ◆实验服灭菌后置于缓冲间或密封好。;5.接种室灭菌;◆用化学灭菌剂消毒 ◆常用化学灭菌剂 ◆灭菌步骤： ①流水冲洗或洗洁精漂洗 ②用化学灭菌剂浸润灭菌，最好加吐温-80等表面活性剂(灭菌液的0.5%)，一般70%酒精30S，0.1-1%升汞5-8 min。 ③无菌水冲洗3-5次。 注：灭菌液要浸没材料 ;常用灭菌剂的使用浓度与效果比较;7.物体表面灭菌;◆新建培养室用前一定要彻底熏蒸1次。 ◆隔2-5天用洗衣粉水或来苏水拖地1次，用高锰酸钾擦架1次。 ;（三）、无菌操作 植物组织培养过程中无菌操作的程序： 1、将初步洗涤剂切好的材料放入烧杯并置 于超净工作台上，看好时间，倒入带有表面 活性剂的化学灭菌剂，并轻摇几次，时间到 了，倒出灭菌液。 2、立即倒入无菌水，轻摇，3~4分钟后将水 倒去，在加入适量的无菌水冲洗3~4次。 3、将灭好菌的外植体放在灭过菌的培养皿 中，然后用镊子或剪刀进行切割。 4、将切好的外植体植入培养基表面。;;八、植物组培快繁的过程： （一）无菌培养（无菌系的建立） 目　的：获得无菌材料和无性繁殖系。 无性繁殖系包括：芽丛、不定芽、胚状体、 原球茎。 ;1、外植体的选择及培养基配制 （1）器官种类 （2）器官的生理状态与发育年龄 （3）取材季节 （4）外植体的大小 培养基：诱导或分化培养基。培养基中CTK多，　　　　IAA少。即CTK /IAA较高。 2、外植体的消毒 根及地下部器官茎尖、茎段、叶片果实、种子;3、外植体的接种 4、外植体的培养 （1）光照：1000~4000LX 12~14 h/d （2）温度：25±2℃ 5、无菌培养阶段结果记录：污染率 ;（二）诱导外植体生长与分化 1、植株再生过程 2、该阶段结果记录：外植体的生长或分化率 ;目的：扩繁无根苗，最后达到边繁殖边生根。;一般25~35d继代一次 该阶段结果的纪录：株高、增殖倍数 ;（四）生根培养;（五）试管苗的移栽;1、移栽成活率低的原因 ;（2）生理功能方面的原因;2、提高试管苗移栽成活率的技术和措施 （1）培育瓶生壮苗 （2）促进试管苗根系发生及功能的恢复 （3）促进茎叶保护组织的发生和气孔功能的 恢复； （4）使用杀菌剂和抗蒸腾剂。