第八讲蛋白质分选与膜泡运输.pptxVIP

第八讲 蛋白质分选与膜泡运输; 核糖体合成的蛋白质，合成之后必须准确无误地运送到细胞 的各个部位，在进化过程中每种蛋白形成了一个明确的地址签 （address target),细胞通过对蛋白质地址签的识别进行运送， 这就是蛋白质的分选;第一节 细胞内蛋白质的分选;一、信号假说与蛋白质分选信号;1960年获得蒂宾根大学医学学位； 1967年在威斯康星·麦迪逊大学获得肿瘤学博士学位； 1967-1968进入了纽约市洛克菲勒大学细胞生物学实验室继续从事生物研究; 1969-1973 在洛克菲勒大学任助教； 1973-76 在洛克菲勒大学任副教授； 1976-今 在洛克菲勒大学任教授； 1986-今 兼任洛克菲勒大学霍华德-休斯医疗中心研究员。;在George Palade用离心技术分离到有核糖体结合的微粒体,即发现膜结合核糖体(membrane-bounded ribosome)之后, 科学家推测:膜结合核糖体合成的蛋白质首先要进入内质网的腔,然后通过选择性的分泌过程输出到细胞外,而游离核糖体上合成的蛋白质则留在细胞内使用。 ;乔治·埃米尔·帕拉德(Palade，George Emil，1912-)，罗马尼亚细胞生物学家。;● 信号序列存在的直接证据 ;加与不加RER小泡,产物不同 当将分泌蛋白的mRNA在无细胞体系中进行翻译时, 如果不加粗面内质网(微粒体), 获得的翻译产物比从细胞中分泌出来的蛋白要长,若添加RER小泡,翻译的产物长度与从活细胞分泌的蛋白相同。因此推测信号序列在引导蛋白进入内质网后被切除了,所以成熟的蛋白的N-端没有信号序列(图9-16)。 ;■ 信号序列的一般特征及早期信号假说;一些信号肽序列;● 早期的信号假说 ;● 信号假说证明: 基因重组实验 ;■ 新蛋白复合物的发现与信号假说的补充 ;● 停靠蛋白 (docking protein, DP) ; 由TRAM蛋白和Sec61蛋白构成，可结合信号肽和停止转移序列，引导新生肽进入ER腔，在形成跨膜蛋白中有重要作用。;● 释放到内质网腔蛋白的合成（分泌蛋白和驻留蛋白）;+微粒体;● 跨膜蛋白形成;;1）单次跨膜蛋白整合到ER膜的方式： 单次跨膜蛋白有一个末端起始转移序列，一个停止转移序列，依靠停止转移序列跨膜。 　　或只有一个中间转移信号序列,依靠其转移和跨膜。;2）双次跨膜蛋白整合到ER膜的方式： 一个中间开始转移序列，一个停止转移信号，依靠二者共同跨膜。 ;3）多次跨膜蛋白整合到ER膜的方式： 具有两个以上中间转移序列和停止转移序列，多肽链前后来回重复的通过脂双层。;二、蛋白质分选转运的基本途径与类型; 根据蛋白质分选的转运方式或机制不同，又可将 蛋白质转运分为4类：;三、蛋白质向线粒体、叶绿体和过氧化物酶体的分选;蛋白质合成定位的特点：后转移方式 转运前的状态： 伸展的前体蛋白 N端的蛋白质信号序列称导肽 前体蛋白=成熟蛋白+导肽;1 线粒体前体蛋白定位分选信号;线粒体基质蛋白的定位分选信号为可剪切的前导序列.参与该运输途径的蛋白质分子机器主要有：TOM、TIM23 和PAM 复合体。;3 线粒体前体蛋白质向内膜的转运;4 线粒体前体蛋白向膜间隙的转运;5线粒体前体蛋白向线粒体外膜的转运;6 叶绿体蛋白质的转运;不同点： 转运到叶绿体类囊体腔 前体蛋白含有两个N端信号序列，第一个被切除后，暴露出第二个信号序列，将蛋白导向内膜或类囊体膜。 转运到叶绿体类囊体膜 前体蛋白，N端的导肽引导蛋白通过叶绿体膜进入基质， 肽酶水解导肽。引导蛋白质到达类囊体膜的信息，蕴藏在成熟蛋白C端的跨膜区域。 （图）;7 过氧化物酶体蛋白的分选;; 第二节 膜泡运输;网格蛋白有被小泡； COPII有被小泡； COPI有被小泡；;1）网格蛋白包被小泡 结构： 网格蛋白组成外层结构骨架； 接合素构成内壳。 功能： a.负责蛋白质从高尔基体TGN到质膜、胞内体或溶酶体和植物液泡的运输。 b.在受体介导的细胞内吞途径中负责将物质从质膜运到细胞质，以及从胞内体到溶酶体的运输。 ;① 网格（笼形）蛋白: 由3个重链和3个轻链形成的具有3个曲臂形状（triskelion）的蛋白。笼形蛋白的曲臂部分可相互交织，形成5/6边形网孔的“笼子”。 ;②接合素/衔接蛋白（adaptors） 介导网格蛋白与膜受体之间的连接。 类型： AP1：高尔基体→内体的蛋白运输； AP2：质膜→内体的蛋白运输； AP3：高尔基体→溶酶体的蛋白运输。 ;当笼形蛋白衣被小泡形成时，发动蛋白聚集成一圈围绕在芽的颈部，将柄部的膜尽可能地拉近（小于1