丙型肝炎病毒实验室检测技术（63页）.pptVIP

20 位患者 20% 痊愈 100 位 HCV 急性感染 80 位患者 80% 持续感染 24 位患者 30% 稳定，慢性，无进展 28 位患者 28 位患者 56 位患者接受抗病毒治疗 持久性应答 (50%) 肝脏疾病终末期，肝细胞癌，肝脏移植，死亡 治疗失败 (50%) 30% 呈严重进展 40% 有不同程度的进展 32 位患者 24 位患者 （五）HCV 感染的预后  诊断、监测 方法 HCV血清学试验 EIA检测抗HCV、Immunoblot assay HCV-RNA定性试验 PCR、TMA HCV-RNA定量试验PCR、bDNA ALT 肝纤维化非损伤试验 肝活检 基因分型  诊断丙肝感染者和现患病人的最佳实验室方法 National Institute of Health Consensus Development Conference Statement: Management of Hepatitis C:2002-June 10-12,2002 二、实验室检测技术 检测方法: 抗体检测 抗原检测 核酸检测 基因型检测 病毒细胞培养 耐药检测 生化检测方法 HCV病毒的基因结构及免疫诊断资源 core E1 E2 NS2 NS3 NS4 NS5 各种基因产物作为免疫诊断的特异性： NS3 core NS4 NS5 HCV免疫诊断抗原的策略 NS3+core NS3+core+NS4 NS3+core+NS4+NS5 （一）抗-HCV检测 抗-HCV检测分为筛查试验和补充试验（免疫印迹试验） 筛查试验：酶联免疫吸附试验、胶体金法快速试验、化学发光试验、免疫荧光试验 （1）HCV感染疫情报告的检测流程 （2）临床诊断筛查检测流程 临床诊断补充试验检测方法-1流程 附：免疫印迹试验—HCV Blot 3.0 3+质控带 (血清加样） 核抗原带 NS3-1 NS3-2 NS4 NS5 1+质控带 (试剂加样) GST质控带 HCV蛋白 确证试剂 包含HCV蛋白 血清质控带 血清转换期样本 注：1，2，3为阳性样本 4为阴性样本 HCV BLOT 3.0结果分析 膜条呈现 结果分析 所有条带出现1+反应度 阴性 2条或更多HCV条带呈1+反应度，或核抗原带呈2+反应度 阳性 仅一条HCV条带呈1+以上反应度， 或抗原条带呈1+以上，但2+以下反应度 不确定 * 仅有GST带反应可判为阴性 GST 质控带反应度为1+或以上，加上1条或更多HCV条带呈1+反应度可读成不确定。 3+质控带(血清加样) 核抗原带 NS3-1 NS3-2 NS4 NS5 1+质控带(试剂加样) 临床诊断补充试验检测方法-2流程 附：特定的阈值 部分检测方法/试剂给出了特定阈值（与抗体补充试验比较，其阳性的预测值≥95％）时使用。 高S/CO比值：当S/CO比值≥特定的阈值时；低S/CO比值：其S/CO比值特定的阈值。 初筛和复检均为阳性，且有样品OD值与临界值（Cutoff）的比值（S/CO）≥试剂说明书中给出的特定阈值，可报告“抗-HCV阳性”,无需再做免疫印迹试验；否则，还应进一步作免疫印迹试验。免疫印迹试验结果阳性者，报告“抗-HCV阳性”；结果不确定者，报告“抗-HCV不确定”并进行随访。临床诊断补充试验检测方法二流程。 附：EIA S/CO值与补充试验的相关性 （3）血液筛查检测流程 （4）检测结果的解释 便捷记忆：最终报告以补充试验免疫印迹结果为准。 丙肝抗体假阴性问题 HCV 窗口期 —TRANSFUSION Volume 40, February 2000 （二）抗原检测--意义 HCV血清阳转前的早期急性丙型肝炎辅助诊断，尤其有助于HCV感染窗口期患者、抗-HCV检测结果不确定患者或HCV阳性母亲所生婴儿是否罹患丙型肝炎的辅助诊断； 免疫受损或先天性免疫缺陷群体如HIV感染者、长期透析的肾病患者、器官移植患者或先天性免疫功能缺陷患者等HCV感染的筛查； 抗-HCV阳性感染者的病毒血症分析； HCV感染者治疗前后病毒血症追踪分析。 初次检测抗原阴性样品，报告为“HCV抗原阴性”； 初次检测抗原阳性反应样品，需要双孔复检。 如果双孔复检结果均为阴性，报告为“HCV 抗原阴性”； 如果双孔检测结果至少有一孔结果为阳性反应，则报告为“HCV抗原阳性”。 结果判断 注意事项 由于目前抗原检测试剂的灵敏度较低，最灵敏的检测试剂只能达到相当于500 IU/ml水平的HCV RNA，因此阴性的结果并不能排除HCV现症感染的可能。 HCV抗原阳性仅作为HCV感染的辅助