最新 艾滋病（128页）.pptVIP

* 血清学检测（２） HIV抗体的确证试验——Western blot （免疫印迹试验） * 血清学检测（３） HIV抗原检测——ELISA夹心法 测定p24抗原 敏感性很高（7～10 pg/ml） 特异性稍差（可有假阳性） * 分子生物学检测（1） HIV RNA检测—RT-PCR（逆转录-聚合酶链反应） PCR：高温变性(94℃)→低温退火(55℃)→适温延伸(72℃)；经25~30个循环，成倍数扩增 荧光定量PCR：比常规PCR多一个寡聚核苷酸探针（带一个荧光发光分子和一个荧光淬灭分子） 应用：PCR查PBMCs前病毒DNA；RT-PCR查血浆中的病毒RNA * 分子生物学检测（2） 淋巴细胞HIV RNA检测—— Northern印迹杂交(Northern blot) 原理： RNA片段经电泳分离，从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜，再用探针杂交 * 分子生物学检测（3） HIV变异株检测——Sanger测序法 原理：核酸扩增时，核苷酸在某一固定点开始，随机在某一特定的碱基处终止，产生A、T、C、G四组不同长度的一系列核苷酸，通过在尿素变性的PAGE胶上电泳，获得DNA序列 * 病毒检测 血浆、单核细胞、脑脊液可分离出HIV 操作复杂，主要用于科研 * 诊 断 * 诊断原则 流行病学史：有静脉注射毒品史；多个性伴和不洁性生活史；输入未经HIV抗体检测的血液和