呼吸道标本培养.ppt

下呼吸道感染细菌培养;痰的来源？ 是否被上呼吸道污染？;口咽部定植菌群变化对肺部感染的影响;破坏正常菌群常见因素;肺部感染的常见机制;下呼吸道感染的主要类型及常见病原体（1）;下呼吸道感染的主要类型及常见病原体（2）;痰涂片对下呼吸道感染病原菌诊断的作用;来自下呼吸道的成分;分析前;9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。*** 10、低头要有勇气，抬头要有低气。**** 11、人总是珍惜为得到。***** 12、人乱于心，不宽余请。**** 13、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。***** 14、抱最大的希望，作最大的努力。**** 15、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。。***** 16、业余生活要有意义，不要越轨。*** 17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。****;分析前;一、痰（细菌）培养适应症;二、标本采集、运送;仅当气管插管的患者出现肺炎症状时（如发热或浸润），可考虑采集气管吸出物标本； 从气管中吸痰，用无菌容器留取送检。 注：气管在插管24h后即有定植菌，若未有肺部感染指征时送检气管吸出物，可导致结果可能与疾病不符。;③血培养;④气管镜标本;标本运送;分析中;一、痰及气管吸出物标本处理;③培养 接种平板后，用无菌拭子涂抹玻片，涂片应薄且均匀（透过涂片部位可看清楚下面印刷品的字迹）。 自然干燥或恒温干燥器上干燥后，经甲醇固定（化学纯，在棕色玻璃瓶或塑料容器中贮存）或火焰快速固定3次，革兰染色，晾干后读片。 ④标本涂片及革兰染色 注1：革兰染色脱色时间因选用不同的脱色剂而异。1）95%乙醇脱色时间为30s；2）丙酮-乙醇 （体积比为3:7,棕色瓶室温保存，有效期1年）脱色时间1s～5s，脱色效果一致性好； 3）丙酮（试剂纯）脱色时间最短，当标本中含大量宿主细胞时脱色效果好。 注2：使用革兰染色仪染色的实验室按照厂家操作说明书进行，注意条件优化，使涂片染色结果达到满意效果。 ⑤显微镜观察革兰染色结果;指征;指征;指征;白细胞和优势菌（不粘附在鳞状上皮细胞上）有助于预测肺部致病菌，应该报告； 每个油镜视野可见大于10个或小于10个单一形态细菌并与白细胞相关（在白细胞周围，特别是位于白细???内的细菌），有助于预测肺部致病菌，应该报告；涂片中少于1个菌/20个油镜视野的少量细菌不必报告； 虽然由两种致病菌同时引起的感染不常见，但当两种形态的细菌均与白细胞相关时也应报告； 即使涂片未见细菌时仍有助于评价患者状况，可能隐藏着某些特殊菌，如军团菌、内源性真菌、结核分枝杆菌或其他可引起非典型肺炎的致病菌； 质量合格的标本中，涂片有正常菌群及多种细菌（通常白细胞内有空泡或液泡），提示有吸入性肺炎，应该报告。;用革兰染色来评估呼吸道标本是否合格;你看见多少种形态细菌？;细胞内细菌;呼吸道标本中未被染色的，有折射的杆菌=抗酸杆菌;淀粉样小体： 见于迁延长时间的呼 吸道疾病如慢性阻塞性肺病;胖的，圆末端的，菌体两极常被染为革兰阴性的杆菌提示肠杆菌科细菌;出芽的酵母样孢子和假菌丝 通常提示鹅口疮或上呼吸道酵母菌感染，不是肺炎。仅当其为主要所见菌时报告;免疫抑制患者 ? 奴卡氏菌、放线菌——革兰阳性不规则“球菌”，分叉，无短链，链的末端的呈尖状，都证明是分枝状的 G+b;分析后;一、分离并鉴定下呼吸道重要致病菌;2、肺炎链球菌 ? 鉴别草绿色链球菌和肺炎链球菌： ①胆汁溶菌试验： 在菌落上滴10%去氧胆酸钠溶液1滴，35℃15’～30’，若菌落溶解，报告“肺炎链球菌”；若菌落不溶解，则用奥普托辛（OP）敏感试验再确认。 ②OP敏感试验： 菌落密涂于血平板，粘贴OP纸片（5μg/片），经35℃、5%CO 2 环境过夜培养，若出现抑菌圈（直径14mm判为S），报告“肺炎链球菌”； ③药敏试验： 快速挑起相似菌落，做药敏试验；同时粘贴OP纸片确认纯度，以检查药敏结果是否混有其他草绿链。 ? 存在对胆汁耐受或对奥普托辛耐药的肺炎链球菌株，将这两个试验联合检测可减少错误报告。;（二）苛氧革兰阴性杆菌 1、流感嗜血杆菌 卫星试验：血平板生长（-），血平板卫星（+）（菌落不溶血） MH平板卫星（-）流感嗜血杆菌；并做β-内酰胺酶； 2、博德特菌属 ?有重要临床意义的博德特菌在血平板上生长，触酶和脲酶均为阳性，培养48h出现肉眼可见菌落。 3、其他苛养革兰阴性杆菌 ? 除非呈优势生长或数量很多，通常无需鉴定其他苛养的革兰阴性杆菌，如艾肯菌属，均为上呼吸道正常菌群，很少引起呼吸系统疾病。;（三）革兰阴性双球菌 ? 有临床意义的革兰阴性双球菌，主要是卡他莫拉菌和脑膜炎奈瑟菌，依照以下快速试验筛查： ? 检测有意义数量的、用接种环可推移的菌落，确认是卡他莫拉菌，90%以上卡他莫拉菌株的β-内酰胺酶试验为