同位素稀释―气相色谱―质谱法测定食用植物油中总氯丙醇脂肪酸酯.docxVIP

同位素稀释―气相色谱―质谱法测定食用植物油中总氯丙醇脂肪酸酯 纲要成立了食用植物油中总氯丙醇脂肪酸酯（氯丙醇酯）的同位素稀释气相色谱质谱（ GCMS）检测方法。样品经甲醇钠甲醇溶液水解，硅藻土小柱净化，七氟丁酰咪唑 （HFBI）衍生后， GCMS检测，同位素内标法定量。 3MCPD 酯、2MCPD 酯、1，3DCP酯和 2，3DCP酯在 0.050～ 2.000 mg/L 浓度范围内，均呈优秀线性有关， 有关系数（ R）均大于 0.9995。 3MCPD 酯、 2MCPD 酯、 1，3DCP酯和 2， 3DCP酯的检出限分别为 0.015， 0.015， 0.030 和 0.030 mg/kg ，定量限分别 为 0.050， 0.050， 0.100 和 0.100 mg/kg 。以空白特级初榨 橄榄油为空白基质的加标回收实验的平均回收率为87.0%～ 110.5%，相对标准偏差（ RSD）均小于 10.1%。在 74 份食用 植物油样品中， 3MCPD 酯、 2MCPD 酯和 1， 3DCP酯的检出 率分别为 94.6%， 63.5%和 5.4%，未检出 2，3DCP酯；3MCPD 酯、 2MCPD 酯和 1， 3DCP酯的含量分别在未检出（ ND）～ 10.646 mg/kg 、 ND～ 3.617 mg/kg 和 ND～ 0.089 mg/kg 之间。 本方法简便、正确、可靠，适用于食用植物油中总氯丙醇酯 的测定。 关键词 食用植物油； 氯丙醇脂肪酸酯； 气相色谱质 谱法； 同位素稀释技术 引言 氯丙醇脂肪酸酯（氯丙醇酯）是存在于含油脂食品中的 一类污染物，是脂肪酸与氯丙醇的结合产物，包括单氯取代 的 3 氯 1，2 丙二醇脂肪酸酯（ 3MCPD 酯）和 2 氯 1，3 丙二醇脂肪酸酯（ 2MCPD 酯），以及双氯取代的 1，3 二氯 2 丙醇脂肪酸酯（ 1， 3DCP酯）和 2， 3 二氯 1 丙醇脂肪酸酯（ 2， 3DCP酯）。已有动物体内实考证明， 3MCPD 酯在体内经肠脂 肪酶水解后转变为 3MCPD[1， 2]。毒理学资料表示， 3MCPD 具有遗传毒性、肾脏毒性和神经毒性 [3 ～5]； 2MCPD 的构造 与 3MCPD 极其相似，其毒性以及可能引起的健康风险不容 忽略； 1， 3DCP可致使小鼠肝脏和肾脏的损伤， 2，3DCP对 肾脏的损伤作用超过 1，3DCP[6]。 Liu 等 [7] 研究了 3MCPD 棕 榈酸单酯和双酯对瑞士小鼠的急性口服毒性以及对NRK52E 大鼠肾脏细胞的毒性，结果表示， 3MCPD 棕榈酸单酯和 3MCPD 棕榈酸双酯均可引起大鼠肾小管坏死、蛋白质管型、 生精小管的精子细胞减少等症状； 3MCPD 棕榈酸单酯可引起 大鼠肾脏细胞的细胞毒性，而双酯则未发现引起细胞毒性的 迹象，可见 3MCPD 棕榈酸单酯毒性强于其双酯。 食品中氯丙醇酯的检测方法包括间接测定法 [8～ 10]（即 气相色谱质谱法（ Gas chromatographymass spectrometry ， GCMS））和直接测定法 [11，12]（即液相色谱质谱法（ Liquid chromatographymass spectrometry ，LCMS））。GCMS方法应用 较为普遍，文件报道的各样以 GCMS 测定氯丙醇酯的方法， 绝大部分上是鉴于德国脂肪科会（ DGF）的 CVI 18（ 10）方 法[13] ，实验步骤（见图 1，以 3MCPD 酯为例）主要包括样品水解、净化、衍生。在已报道的氯丙醇酯的测定方法中， 主假如针对 3MCPD 酯的测定。鉴于其它氯丙醇及氯丙醇酯 的毒性作用，需对氯丙醇酯总量进行测定。 氯丙醇酯主假如在食品加工过程中，尤其是在油脂精华 过程中形成的 [14] ，污染水平最高的是 3MCPD 酯 [3] ，其次是 2MCPD 酯。食用植物油是人类膳食的重要组成部分。 食用植 物油中氯丙醇酯污染水平较高 [15， 16]，由食用植物油引起 的氯丙醇酯膳食暴露风险也随之增高，这使得氯丙醇酯成为 近年来国际食品安全研究的重要热点问题。在各样氯丙醇酯 气相色谱质谱检测的基础上，本研究成立了同位素稀释技术 的固相支持液液萃取净化 GCMS方法测定食用植物油中氯丙 醇酯总量的检测方法，通过对 74 份食用植物油样品的检测 和参加英国食品剖析能力评论项目 （ FAPAS）国际比对查核， 证明本方法简便、灵敏、正确、可靠，为进行食用植物油中 氯丙醇酯的膳食暴露评估提供了有力的技术支持。 实验部分 2.1 仪器与试剂 Agilent7890 GC5975C MS 气相色谱质谱联用仪（美国 Agilent 公司）；MilliQ 超纯水器（美国 Millipore 公