核酸酶促降解和核苷酸代谢.pptxVIP

第十章????核酸酶促降解和核苷酸代谢 ? ;第一节 核酸酶促降解 所有的细胞内均含有降解核酸的酶类,它们协同作用可把核酸彻底分解为嘌呤、嘧啶、戊糖和磷酸。 核酸的降解 水解核酸3’，5’-磷酸二酯键的酶，称为核酸酶。 核酸酶分为核酸内切酶和核酸外切酶： 内切酶；从核酸的内部切断磷酸二酯键。 外切酶：从核苷酸链的3’-未端或5’-未端逐个水解切 下单核苷酸。 ;根据核酸酶对底物的专一性将其分为三类: 1.?核糖核酸酶 (RNase) 2. 脱氧核糖核酸酶(DNase) DNase只能水解DNA的磷酸二酯键。胰DNase I 可切割双链和单链DNA，产物为5’-磷酸寡核苷酸、牛脾DNaseII降解DNA则产生3’-磷酸为未端的寡核苷酸。 3. 非特异性核酸酶 RNA、DNA均可水解。 例如：小球菌核酸酶是内切酶，可作用RNA或变性DNA，产生3’-P-核苷酸，而蛇毒磷酸二酯酶则能从RNA链或DNA链的3’-羟基末端逐个切割核苷酸，生成5’-P-核苷酸。牛胰核酸酶5’-外切酶产物为3’-P-核苷酸。;限制性内切酶;限制性内切酶II 对双链DNA中4-6个bp所组成的特异序列进行专一识别，并在此序列中按对称顺序同时切断2条DNA链。 如 E.COR I： 5’ –G|AATTC – 3’ 3’– CTTAA|G –5’;; 分子刀-DNA限制性内切酶;;重组DNA分子的操作;; 限制性内切酶名称的第一个字母取自获得此内切酶的细菌属名的第一个字母，用大写。 名称的第二、三个字母取自该细菌种名的头二个字母，用小写字母。 如果该细菌还有不同的株系，则另加第四个代表株系的字母或数字；最后是用罗马字大写的数字，代表同一菌株中不同限制性内切酶的编号。 如Hind Ⅲ代表从流感噬血杆菌d株（haemophilus influenzae）中分离到的第三种内切酶。 ;一、核苷酸的降解 核苷酸在核苷酸酶的作用下水解为磷酸和核苷。核苷酸酶有两类：一类是非特异核苷酸酶，对2’,3’或5’核苷酸均可水解，另一类是特异性强的核苷酸酶，有3’-核苷酸酶，5’-核苷酸酶。 核苷经核苷酶作用后，产生嘌呤、嘧啶??核糖。这类酶也有两类:一类是核苷磷酸化酶，它催化核苷水解产生碱基和磷酸核糖;另一类是核苷水解酶，它分解核苷产生碱基和核糖。 核苷磷酸化酶 核苷 + 磷酸 ============ 碱基 + 磷酸核糖 动物、反应可逆? 核苷水解酶 核苷 + H2O ==================== 碱基 + 核糖 植物和微生物、不可逆 ;二、嘌呤的降解 不同的生物对嘌呤的分解能力不同,因而具有不同的代谢终点（分解终产物不同）。;人类和灵长类;三、嘧啶的降解 一般具有氨基的嘧啶碱需要水解脱去氨基，如胞嘧啶生成尿嘧啶，尿嘧啶或胸腺嘧啶经还原生成二氢尿嘧啶或二氢胸腺嘧啶。DHU经水解使环裂开，生成?-脲基丙酸,再水解生成CO2、NH3和?-丙氨酸。DHT也发生类似水解反应，先生成?-脲基异丁酸，后者水解生成CO2、NH3和?-氨基异丁酸。;嘧啶碱的分解代谢;第三节 核苷酸的合成代谢 植物、动物和微生物，一般都能够合成各种嘌呤和嘧啶核苷酸，它们的合成途径大致相同。 通常核苷酸的生物合成有两条主要途径: 从头合成 利用简单的原料如氨基酸、甲酸盐和CO2等合 成核苷酸。 补救途径 利用核酸降解的中间产物或外源的核苷与嘌呤 碱和嘧啶碱直接合成新的核苷酸。 ;核苷酸合成的两条途径;一、嘌呤核苷酸的生物合成 1、从头合成 以5’-磷酸核糖-1-焦磷酸(PRPP)提供核糖,在此基础上逐步进行嘌呤环的“组装”。首先形成IMP（次黄嘌呤核苷酸）,以后再转化为其它各种嘌呤核苷酸。 ??;次黄嘌呤核苷酸(IMP)的合成途径所需酶 ;IMP的合成途径 ： PRPP经11 Step