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第三章 生物物证常见技术;第一节 电泳技术;电泳原理;电泳的分类 ;区带电泳分类;;;;电泳步骤;1、高压电极槽与进样机构? 2、填灌清洗机构? 3、毛细管? 4、检测器?? 5、铂丝电极?? 6、低压电极槽?? 7、恒温机构??? 8、记录/数据处理 ;;第二节 层析法;;;层析操作;;;;;;第三节 比色技术;比色技术分类;;比色仪器;722;第四节 离心技术;F?=重力-浮力 =?VPg?-?Vδg?=?Vg?(?p?-?δ?)
式中:
?F?—— 下沉力;
V?—— 微粒体积;
P?—— 微粒密度;
δ?—— 介质密度;
g?—— 重力加速度。
当?P?>?δ?时,微粒下沉;?P?与?δ?差值越大,微粒下沉速度越快。因此,加大离心机转速可加快离心微粒的沉降速度 ;离心机分类;;(三)根据体积大小和放置方式分类
1 、台式离心机:体积小,放在操作台上,用于微量物质的提取。
2 、落地式离心机:体积大,放在地面上,用于大量物质的提取。;(四)根据供能方式 分类
1 、自动式离心机:设置程序后,电脑程序控制离心速度和时间。
2 、电动式离心机:由操作者接通电源、利用旋钮控制离心速度和时间的离心机。
3 、手动式离心机:
;第五节 显微镜技术;一、发明;二、分类;三、显微镜的使用方法;2.?接物镜的使用及光线的调节:?
????????显微镜一般具有三个接物镜,即低倍、高倍及油镜,固定于接物镜转换盘孔中。观察标本时,先使用低倍接物镜,此时,视野较大,标本较易查出,但放大倍数较小。后高倍接物镜放大的倍数较大,能观察微小的物体或结构。再使用油镜观察,一般加一滴油后直接将油镜头浸入油滴中进行镜检观察。?
;3.?低倍、高倍、油镜头的识别:?
?????(1)标明放大倍数10×,40×,100×,或10/0.25,40/0.65,100/1.30。?
?????(2)低倍镜最短,高倍镜较长,油镜最长。?
?????(3)镜头前面的镜孔低倍镜最大,高倍镜较大,油镜最小。?
?????(4)油镜头上常刻有黑色环圈,或“油”字。?
?;?4.
(1)光线对好后,移动推进器寻找需要观察的标本。?
(2)如标本的体积较大,不能清楚查见其构造因而不能确认时,则将标本移至???野中央,再旋转高倍接物镜于镜筒下方。?
(3)旋转微调节器至物象清晰为止。?
(4)调节聚光器及光圈,使视野内的物象达到最清晰的程度。?
;?5.?油镜的使用方法:?
????(1)原理:
油镜的透气孔最小,这样进入的光线就少,物体不易看清楚。
同时又因自玻片透过的光线,由于发生了折射散光,因此射入镜头的光线就更少,物体更看不清楚。
采用一种和玻片折光率相接近的介质如香柏油,加于标本与玻片之间,使光线不通过空气,这样射入镜头的光线就较多,物象就看得清楚。 ;(2)油镜的使用:?
?a.将光线调至最强(聚光器提高,光圈开放)。?
?b.转粗调节器使镜筒上升,滴香柏油1小滴于接物镜正下方标本上。?
?c.转动接物镜转换盘,使油镜头于镜筒下方。?
?d.俯身镜旁侧面在肉眼的观察下,转动粗调节器使油镜头徐徐下降浸入香柏油内,轻轻接触玻片为止。? ;;??6.?注意事项:?
(1)使用显微镜之前,应熟悉显微镜的各部名称及使用方法,特别应掌握识别三种接物镜之特征。?
(2)观察无色和颜色较浅的标本时,必须注意光线的调节。?
(3)新鲜标本观察时,须加盖玻片,以免标本因蒸发而干燥变形或污染侵蚀接物镜,同时可使标本表面匀平,光线得以集中,有利于观察。
;四、显微镜的保养;4.显微镜不能在阳光下暴晒和使用。?
5.接目镜和接物镜不要随便抽出和卸下必须抽取接目镜时,须将镜筒上口净用布遮盖,避免灰尘落入镜筒内。更换接物镜时,卸下后应倒置在清洁的台面下,并随即装入木箱的置放接物镜的管内。?
6.显微镜用完后,取下标本片,经聚光器降下,再将物镜转成“八”字形,转动粗调节器使镜筒下降,以免接物镜与聚光器相碰。?
7.显微镜应放在干燥的地方,以防生霉。?
;第一节 电泳技术;;比色仪器;722;F?=重力-浮力 =?VPg?-?Vδg?=?Vg?(?p?-?δ?)
式中:
?F?—— 下沉力;
V?—— 微粒体积;
P?—— 微粒密度;
δ?—— 介质密度;
g?—— 重力加速度。
当?P?>?δ?时,微粒下沉;?P?与?δ?差值越大,微粒下沉速度越快。因此,加大离心机转速可加快离心微粒的沉降速度 ;离心机分类;第五节 显微镜技术;三、显微镜的使用方法
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