凝集反应ppt演示课件.pptVIP

四、明胶凝集试验（gelatin agglutination test, GAT） 原理：将病毒抗原或重组抗原吸附于粉红色明胶颗粒上，当致敏颗粒与样品血清作用时，若血清含有抗病毒抗体则可形成肉眼可见的粉红色凝集 五、间接凝集试验的应用 1. 抗体的检测 　①检测细菌、病毒寄生虫感染后产生的抗体 　②自身免疫病患者的抗体的检测 ③变态反应患者的抗体的检测 2. 抗原的检测 反向间接凝集试验可用于检测病原体的可溶性抗原， 也可用于检测各种蛋白质成分。 凝集反应 第一节 凝集反应的特点 凝集反应定义 细菌、螺旋体、红细胞或细胞性抗原等颗粒性抗原，或可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒结合成致敏颗粒后，它们与相应抗体（或抗原）发生特异性反应，在适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集现象。 反应阶段： 抗原抗体的特异性结合 出现肉眼可见的凝集现象 反应特点： IgM的作用比IgG大数百倍 IgG与抗原结合后，常不出现凝集反应，称不完全抗体 定性 半定量 效价（滴度）：将标本进行一系列对比稀释后反应，以出现阳性反应的最高稀释 度为效价（滴度） 可见反应形成 第二节 直接凝集反应 直接凝集反应(direct agglutination)： 颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的参与下可直接与相应抗体结合出现肉眼可见的凝集现象。 凝集原(agglutinogen)：凝集反应中的抗原。 凝集素(agglutinin)：凝集参与反应的抗体 一、玻片凝集试验(slideagglutination test) 原理：通常以已知抗体作为诊断血清，与待测颗粒抗原在有电解质存在下，作用一定时间，通过凝集与否，进行细菌或红细胞定性（或定型）。 + ? 方法评价： 定性试验、 简便、快速、 敏感度低 临床应用 菌种鉴定 血清学分型血型鉴定 二、试管凝集试验(tube agglutination test) 原理：是细菌或红细胞等颗粒性抗原与相应抗体在试管中直接凝集，出现肉眼可见的凝集现象。 多用以测定抗体 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 弃掉0.5 试管凝集试验原理 结果 1 2 3 4 5 6 7 菌液 试管凝集试验 方法评价： 半定量试验、简便、快速 敏感度低、可有假阳性 临床应用： Widal reaction Weil-felix reaction Wright test:布鲁菌病 交叉配血试验 第三节 间接凝集反应 间接凝集反应(indirect agglutination): 将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表面，然后与相应的抗体或抗原反应，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象，或称为被动凝集反应(passive agglutination) 适用于各种抗体和可溶性抗原的检测 载体(carrier)：试验体系中与免疫无关的颗粒。 致敏：抗原(或抗体)偶联于颗粒表面的过程。 致敏颗粒（sensitized particle):吸附有已知抗原或抗体的颗粒。 载体种类及其处理方法 ☆红细胞： 新鲜红细胞吸附蛋白质的能力差。一般先醛化后应用。 ☆聚苯乙烯胶乳颗粒： 可物理吸附蛋白质；常制备带有化学活性基团（羧基）的颗粒 ☆金黄色葡萄球菌蛋白A（SPA）: 具有与IgG Fc段结合的特性。 载体 可溶性抗原 致敏 致敏颗粒 NS 凝集颗粒 间接凝集试验示意图 一、间接凝集反应类型 根据致敏用的试剂和反应方式分为： 正向间接凝集试验 反向间接凝集试验 间接凝集抑制试验 协同凝集试验 载体 可溶性抗原 致敏 致敏颗粒 NS 凝集颗粒 （正向）间接凝集试验 用特异性抗原致敏载体，检测标本中的相应抗体的方法。 待测抗体 反向间接凝集试验 ＋ 用特异性抗体致敏载体，检测标本中的相应抗原的方法。 载体 已知抗体 致敏 致敏颗粒 NS 凝集颗粒 待测抗原 间接凝集抑制试验 待测抗原 已知抗体 特异结合 抗原抗体复合物 NS ＋ 致敏颗粒 用抗原致敏载体及相应抗体作为诊断试剂，用于检测标本中是否存在与致敏载体相同的抗原。 无凝集颗粒为阳性 间接凝集抑制试验 待测抗原 已知抗体 无结合 抗原抗体分散 NS ＋ 致敏颗粒 有凝集颗粒为阴性 协同凝集试验(coagglutination test) 原理：SPA能与血清中的IgG类抗体的Fc段非特异性结合，而两个Fab段暴露在葡