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图解NF-B信号通路专题 2.IKK的激活 ★IKK复合物的激活首先是需要IKK亚基的T环丝氨酸的磷酸化。但是目前这种磷酸化的机制并不明确。其中，IKKβ的磷酸化位点是丝氨酸177和181， IKKα的磷酸化位点是丝氨酸176和180。另外，激活的T环丝氨酸如果突变成谷氨酸则会产生IKK激活，而突变成丙氨酸则会取消信号应答。 ★ IKK复合物的激活中一个普遍的元素是：对TRAF家族成员的需要和诱导TRAF的寡聚化从而向下传递信号。这说明信号复合物的集合对于IKK的激活的重要性。 ★ NEMO的C-末端区域介导IKK的激活。被RIP1介导的NEMO的可诱导的寡聚化被认为可以激活IKK，并且这一点已经得到了证明。 但是，根据以上的发现，我们并不能得到IKK激活的具体机制。 IKK激活需要的条件 最近的一些发现为我们在研究IKK的激活的机制上提供了线索： ① ② ③ 在 酵母中，野生型的IKKβ表达的激酶活性被NEMO的共表达所提高，而那些T环被突变成谷氨酸的IKK，其活性也很高，但是其活性不会随着NEMO 的共表达发生变化。 说明：IKK的激酶活性被NEMO所提高，是通过IKK的T环磷酸化促进而发生的。 研究发现，反式自磷酸化作为NEMO和IKK的一种本能的高次结构构成结果而发生，其展开的分子量近似激活的IKK。 说明：反式自磷酸化可能是IKK激活的主要机制。 IKK的NBD区域的丝氨酸残基的磷酸化，可以抑制IKK的活性，和阻止通过与NEMO的共表达而发挥作用的IKK活性的增加。 说明：NBD/NEMO之间的作用对于NEMO介导的IKK激活很重要。 IKK激活机制的探索 因此，我们可以知道在IKK激活中，反式自磷酸化是主要的作用机制。 IKK激活途径可能是一个反馈调节的重要机制。接受刺激后，NEMO与IKK的结合区域被磷酸化，磷酸化位点为丝氨酸68。这个磷酸化可诱导NEMO二聚体的分离，和阻碍IKK与NEMO之间的相互作用，从而终止信号通路。这种构象的变化可被伴侣分子HSP-90或IKK复合物的磷酸化酶所识别，通过HSP-90或者NEMO在丝氨酸68的脱磷酸化的作用，可以使IKK复合物恢复活性。 根据以上的研究发现，IKK的激活模型被提出。（见下页） IKK激活的反馈调节 IKK的激活模型 ☆1.在静息状态下，(NEMO2IKKα1IKKβ1)复合物中，IKKs通过与NEMO相互作用而被抑制。 ☆ 2.在有刺激物的情况下，NEMO结合一个RIP蛋白（NEMO泛素化），使IKK的蛋白激酶区域暴露，诱导T环丝氨酸残基的反式自磷酸化或者由IKK-K磷酸化T环丝氨酸残基。 ☆3.被激活的IKK可磷酸化下游的酶作用底物（如IκB s），从而激活NF-κB信号通路。 被激活的IKK还可磷酸化IKKβ的丝氨酸740和NEMO的丝氨酸68,使得NEMO二聚体与IKK的分离,阻止激酶的反复激活。 ☆4. Cdc37/HSP-90（伴侣分子）和 PP2A/PP2Cβ（磷酸化酶）可以介导IKK复合物的重组。 小结 ①在NF-κB信号通路中，寡聚化的出现是一个共有的主题。 ☆ TRAF蛋白的寡聚化使其可以顺利向NF-κB信号通路下游传递信号。 ☆ RIP蛋白的寡聚化在NF-κB经典信号通路中是必需的。其与NEMO相互作用诱导IKK复合物的积聚。 ☆ NEMO的寡聚化/泛素化在激活NF-κB信号通路中也是很重要的。 同时，NEMO的泛素化在DNA损伤反应中也很重要。 ② 一个复杂的NF-κB信号通路中，对于IKK的激活，是需要上游信号元件的寡聚化和泛素化。 但是，在非经典信号通路中，RIP介导的NEMO的寡聚化不会发生，IKKα是通过NIKS直接介导T环磷酸化所激活的。IKKα对于NEMO的低亲和力也促使NIK进入IKKα的T环发挥作用，而不是IKKβ。 ③ IKK的激活是一个短暂事件，其从属于反馈调节机制。 ☆ 多数的反馈调节机制作用于上游信号元件，其中作用最显著的是脱泛素化酶A20和CYLD。 ☆ IKK的C-末端NBD的磷酸化也是一种重要的反馈调节环的元件。 ☆ 蛋白磷酸酶2A（PP2A），也可以通过转移T环磷酸化来阻碍IKK的激活。 3.IKK的酶作用底物 ★ 自由的IκB家族成员： ① IKKα、IKKβ可磷酸化IκBα丝氨酸32、36和 IκBβ的丝氨酸19、23。其中，作为IKK的酶作用底物， IκBα要优于IκBβ。大多数情况下，IκBβ降解速度比IκBα慢。 ② IKKα可以磷酸化P100的丝氨酸