中药制剂检测技术知识点4：薄层色谱鉴别法项目2任务3知识点4薄层色谱鉴别法.pdfVIP

药品质量与安全专业教学资源库 中药制剂检测技术 项目2 中药制剂的鉴别技术 袁向 讲师 药品质量与安全专业教学资源库 中药制剂检测技术 任务3 理化鉴别法（2 ） 任务3 袁向辉 讲师 任务3 ：理化鉴别法 知识点：四、薄层色谱 （TLC）鉴别法 • 四、薄层色谱（TLC）鉴别法 • （一）概述 • 自20世纪60年代TLC取代纸色谱（PC ）技术作为一种快速、简单、灵敏的 鉴别手段应用于中药及其制剂的鉴别，并收载于《中国药典》以来，在控 制中药质量方面起到积极的作用。随着仪器化、计算机化、自动化等方面 的快速发展，TLC逐步进人了一个仪器化和微机化的阶段。 1.原理 薄层色谱法是将适宜的吸附剂或载体涂布于 玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层，在同 一块薄层板上点加供试品和对照品，在相同条件 下展开，显色剂显色，检出色谱斑点，对比供试 品与对照品的色谱图进行定性鉴别。 • 2.特点 • TLC鉴别法具有设备简单、操作简便、专属性强、展开剂灵活多变、色谱图直 观和容易辨认等特点，是目前中药制剂鉴别的主要方法，使用广泛。 • 其优点体现在五个方面： • （1）离线操作的灵活性： • 各单元操作既有关联，又相 互独立，点样器材和方法、 展开方式、显色试剂选择、 直观比较或扫描比较可根据 需要灵活变通。由于是离线 操作，所以个人占机时间短， 甚至不需要占机。 • （2）正相色谱流动相（展开剂）的广泛适用性： • TLC鉴别最常用的是以硅胶板为基础固定相的正相色谱。 • 有多种组合的有机溶剂展开系统可供选择，如甲苯系统、三氯甲烷系统、己烷 系统、正丁醇系统等。可为酸性、碱性或中性，高极性、中等极性或低极性。 • （3 ）同板多个样品平行比较： • 同板可以同时产生多达16~18个样品色谱，供平行直观地比较，色彩丰富的 像给人的视觉冲击远远大于柱色谱的轮廓色谱图，可以迅速而有效地评价样 品色谱图像之间的相似程度（如下图） 。 不同批次的人参薄层色谱图 • （4）色谱后衍生的灵活性和专属性： • 同一色谱薄层板可生成可见光色谱、紫外光色谱、荧光淬灭色谱或荧光色谱，给 出丰富的被检成分的化学类别信息。 • 如三氯化铝、碘化铋钾、三氯化铁、醋酐-硫酸可分别作为黄酮类、生物碱类、 三萜类和固醇类成分的专属试剂。 • 硫酸则是许多成分激发产生荧光的通用试剂，非常方便。 • 木贼薄层色谱图（三氯化铝乙醇溶液显色） • 黄芪薄层色谱图（硫酸加热显色） • （5）分析结果的直观性： • 分析结果以直观的彩色图像表达，而图像给出的多层面的信息是文字难以表达的， 而且丰富多彩的图像可以给分析者更多思考判断的空间。 薄层色谱鉴别法 （一）概述 u3.对照物的选择 uTLC法用于物质鉴别需要已知物作对照。《中国药典》1990年版开始增加了对 照药材，解决了单一化学对照品不能反映药材的整体特征，一些多种植物共存 的化学成分没有专属性，以及没有化学对照品就无法进行鉴别的问题。 u 《中国药典》2015年版一部收载有对照品、对照药材、对照提取物504种，标 准品32个，预示着由单一指标成分逐渐发展为一组成分来控制制剂的质量。 u （1）采用对照品对照：用已知中药制剂某一药材有效成分或特征性成分对照品 制成对照液，与供试品在同一条件下展开，比较在相同位置上有无同一颜色（或 荧光）斑点，检测制剂中是否含有某原料药材。同时检测多种成分时，可将多个 对照品与供试品分别点在同一薄层板上展开；若待检测的各化学成分化学类型不 同，可按各类成分展开条件在不同薄层板上进行鉴别。 u （2）采用对照品和对照药材或对照提取物同时对照：在选用一种对照物不能满 足制剂TL 鉴别需要时，可采用多种对照物同时对照，增加鉴别的可靠性。 u例如脏连丸处方中君药为黄连，TL 鉴别时仅用小檗碱对照品不能专属性地鉴别 出黄连，因为小檗碱是黄柏等多种药材中含有的一种化学成分，在设小檗碱对照 品的同时增设黄连对照药材，黄连和黄柏所含成分有一定差异，薄层色谱不同， 可检