中药制剂检测技术知识点4：农药多残留量测定法项目4任务6知识点5-气相色谱-串联质谱法.pdfVIP

药品质量与安全专业教学资源库 项 4 中药制剂的杂质检查技术 任务6 农药残留量测定法 袁向辉 讲师 药品质量与安全专业教学资源库 任务6 农药残留量测定法 知识点5 气相色谱-串联质谱法 袁向辉 讲师 中药制剂的杂质检查技术 Ø四、农药多残留量测定法-质谱法 Ø （一）气相色谱-串联质谱法 Ø1.色谱条件 Ø以5%苯基甲基聚硅氧烷为固定液的弹性石英毛细管柱（ 30m×0.25mm×0.25μm色谱柱）。进样口温度240℃ ，不分流进样。载气为 高纯氦气（He ）。进样口为恒压模式，柱前压力为146kPa。程序升温：初始 温度70℃ ，保持2分钟，先以每分钟25℃升温至150℃ ，再以每分钟3℃升温 至200℃ ，最后以每分钟8℃升温至280℃ ，保持10分钟。 气相色谱-质谱联用仪 中药制剂的杂质检查技术 Ø2.质谱条件 Ø以三重四极杆串联质谱仪检测；离子源为电子轰击源（EI ），离子源温度 230℃。碰撞气为氮气或氩气。质谱传输接口温度280℃。质谱监测模式为多 反应监测（MRM ），各化合物参考保留时间、监测离子对、碰撞电压 （CE ） 与检出限参考值见农药多残留量测定法（《中国药典》2015年版通则2341 ）。 为提高检测灵敏度，可根据保留时间分段监测各农药。 Ø3.对照品溶液和内标溶液的制备 Ø （1 ）对照品贮备溶液的制备：精密称取农药对照品适量，根据各农药溶解 性加乙腈或甲苯分别制成每1ml含1000μg的溶液，即得（可根据具体农药的 灵敏度适当调整贮备液配制的浓度）。 中药制剂的杂质检查技术 Ø （2 ）内标贮备溶液的制备：取氘代莠去津和氘代倍硫磷对照品适量，精密称定， 加乙腈溶解并制成每1ml各含1000μg的混合溶液，即得。 Ø （3 ）混合对照品溶液的制备：精密量取上述各对照品贮备液适量，用含0.05%醋 酸的乙腈分别制成每1L含100μg和 1000μg的两种溶液，即得。 Ø （4 ）内标溶液的制备：精密量取内标贮备溶液适量，加乙腈制成每1ml含6μg的溶 液，即得。 Ø （5 ）基质混合对照品溶液的制备：取空白基质样品3g ，一式6份，同供试品溶液的 制备方法处理至 “置氮吹仪上于40℃水浴浓缩至约0.4ml” ，分别加入混合对照品溶 液 （100μg/L ）50μl、 100μl ，混合对照品溶液（1000μg/L ）50μl、 100μl、 200μl、400μl ，加乙腈定容至1ml ，涡旋混匀，用微孔滤膜滤过（0.22μm ），取续 滤液，即得系列基质混合对照品溶液。 中药制剂的杂质检查技术 Ø4.供试品溶液的制备（药材或饮片） Ø取供试品，粉碎成粉末（过三号筛），取约3g ，精密称定，置50ml聚苯乙烯具塞离心管中， 加入1%冰醋酸溶液15ml ，涡旋使药粉充分浸润，放置30分钟，精密加入乙腈15ml与内标溶 液100μl ，涡旋使混匀，置振荡器上剧烈振荡（500次/min ）5分钟，加入无水硫酸镁与无水 乙酸钠的混合粉末（4 ：1 ）7.5g ，立即摇散，再置振荡器上剧烈振荡（500次/min ）3分钟， 于冰浴中冷却10分钟，离心（4000转/min ） 5分钟，取上清液9ml ，置已预先装有净化材料 的分散固相萃取净化管[无水硫酸镁900mg ，N-丙基乙二胺（PSA ）300mg ，十八烷基硅烷 键合硅胶300mg ，硅胶300mg ，石墨化炭黑90mg]中，涡旋使充分混匀，再置振荡器上剧烈 振荡（500次/min ）5分钟使净化完全，离心（4000转/min ） 5分钟，精密吸取上清液5ml ， 置氮吹仪上于40℃水浴浓缩至约0.4ml ，加乙腈定容至1ml ，涡旋混匀，用微孔滤膜（ 0.22μm ）滤过，取续滤液，即得。 中药制剂的杂质检查技术 Ø5.测定法 Ø精密吸取供试品溶液和基质混合对照品溶液各1μl ，注入气相色谱-串联质谱 仪，按内标标准曲线法计算供试品中74种农药残留量。 感