2021年Trizol法提取RNA实验步骤及原理新手详细注释.docxVIP

精品学习资料 名师归纳总结——欢迎下载 法使用步骤Trizol一，分别纯化的基本原理讨论基因的表达和调控经经常要从组织和细胞中分别和纯化RNA；RNA质量的高低经常影响 cDNA库，RT-PCR和NorthernBlot 等分子生物学试验的成败； 法使用步骤 Trizol 一，分别纯化的基本原理 讨论基因的表达和调控经经常要从组织和细胞中分别和纯化 RNA；RNA质量的高 低经常影响 cDNA库，RT-PCR和Northern Blot 等分子生物学试验的成败； Trizol 是一 种新型总 RNA抽提试剂， 内含异硫氰酸胍等物质， 能快速破裂细胞， 抑制细胞释放出 的核酸酶； 二，用户需自备的试剂和材料 无水乙醇， 氯仿，Glycogen（可能需要） ， 1.5ml Eppendorf 管（RNase-free ）， Tips （RNase-free ） 三，预备工作 RNase酶特别稳固，是导致 RNA降解最主要的物质；它在一些极端的条件可以暂 时失活，但限制因素去除后有快速复性；用常规的高温高压蒸气灭菌方法和蛋白抑 制剂都不能是 RNase完全失活；它广泛存在于人的皮肤上，因此，在与 RNA制备有关 的分子生物学试验时，必需戴手套； RNase的又一污染源是取液器， 依据取液器制造商的要求对取液器进行处理； 一般情 况下采纳用 DEPC( 焦炭酸二磷脂，一种 RNase抑制剂