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- 2021-07-16 发布于内蒙古
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休止细胞的制备以及MTT法测脱氢酶活性
休止细胞的制备以及MTT法测脱氢酶活性
休止细胞的制备与MTT 法测定脱氢酶活性
2021级生命基地 秦玉洁 学号:[1**********]9 2021级生命基地 施成瑞 学号:[**************]8级生命基地 钱骋 学号:202100140
指导老师 张怀强
(山东大学微生物技术国家重点实验室)
摘要 休止细胞中基本不含内源营养物质,可以很好地用来研究微生物新陈代谢过程及生理生化性质等。MTT 比色法灵敏度高,被广泛用来研究细胞的生物活性。本实验即利用休止细胞,通过MTT 比色法进行酶催化的动力学分析来研究三羧酸循环中的各种脱氢酶活性随底物浓度的变化情况以及在循环体中的相对顺序。
关键词 休止细胞 MTT比色法 三羧酸循环 底物浓度 酶催化的动力学分析
1. 实验背景
酶。故而研究出脱氢酶活性随底物浓度的变化规律以及各种酶催化的相对顺序具有了很大的价值。
2. 实验原理
2.1休止细胞
休止细胞又称静息细胞,把培养液中各种营养物质和生长因子洗去后悬浮在生理盐水中培养一段时间,以消耗内源营养物质,呈呈饥饿状态的细胞,在研究微生物的生理生化及新陈代谢中有广泛的应用。它的主要特性就是细胞虽
图1 三羧酸循环
然处于休眠状态
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