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支原体又叫霉形体,属柔膜体纲,是一类无细胞壁的细菌,具有多形性,能通过细菌滤器。是目前已知能在无生命的培养基中繁殖的最小原核细胞型微生物。;特点:
(1)无细胞壁,细胞柔软,多形性,能通过细菌滤器
(多形性、可塑性、滤过性)
(2)在人工培养基中生长繁殖,形成“煎荷包蛋状”菌落
(3)基因组较小,0.58-1.35Mb
(4)以二分裂或芽生方式繁殖
(5)对青霉素有抵抗力
常污染实验室培养的细胞及生物制品;一、形态与染色
0.2~0.3μm,外围只有胞浆膜,常呈球状、两极状、环状、杆状??见分枝丝状,无鞭毛,革兰氏染色呈阴性,着色不良,姬姆萨或瑞氏染色良好,呈淡紫色。
支原体的细胞膜具有三层结构,内、外层主要是蛋白质,中间层主要是脂质 (固醇含量高,约占36% )。凡能作用于胆固醇的物质(如两性霉素B、皂素等)均可引起支原体膜的破坏而使支原体死亡。
;二、培养特性
由于基因组小,合成能力较弱,营养要求较高,需添加外源脂肪酸、甾醇、辅酶I、氨基酸等。
生长缓慢(2-6d长出微小菌落),菌落呈“荷包蛋状”(猪肺炎支原体除外),菌落中心深入培养基中,致密、色暗;周围长在培养基表面,较透明。; 可在鸡胚的卵黄囊或绒毛尿囊膜上生长,有些菌株可致鸡胚死亡。也能在细胞培养中生长,不一定引起细胞病变,但可妨碍病毒的细胞培养。;三、与细菌L型的区别;四、生理生化特性;常用的生理生化实验:;五、抗原及分型; 病原性支原体一般不侵入机体组织与血液常常定居于多种动物呼吸道、泌尿生殖道、消化道粘膜表面及乳腺、眼等,引起牛传染性胸膜肺炎、猪喘气病、禽败血霉形体感染等,传播途径主要是呼吸道。
单独感染时,常常症状轻微或无临床表现,当细菌或病毒等继发感染或受外界不利因素作用引起疾病。特点是潜伏期长,慢性及地方性流行。
主要毒力因子:胞黏素,与黏膜呼吸道上皮细胞的纤毛有关,粘附导致纤毛损害并脱落从而使肺易发继发感染。可通过不同机制引起细胞损伤,如获取细胞膜上的脂质与胆固醇造成膜的损伤,释放神经(外)毒素、磷酸脂酶等。 ;七、诊断
直接镜检:形态多样,意义不大。
分离培养:过滤除菌病料,进行细菌L型鉴定及2-3次克隆、纯化(0.45μm过滤),初代分离在含CO2及高湿环境中生长。
生理生化反应:洋地黄苷、脲酶及葡萄糖、精氨酸分解试验。缩小选用抗血清的范围,种的鉴定必须用血清学方法最后确定,这与细菌鉴定到种只需作生理生化测定不同。
血清学检查 :生长抑制试验、代谢抑制试验等
;第2节 猪肺炎支原体; 鸡毒支原体; 嗜血支原体; 立克次体(Rickettsia) ;一、生物学特性
1.多形性,主要是球杆状。 0.3-0.6×0.8-2.0μm
2.大小介于细菌和病毒之间,多数不能通过细菌滤器。
3.革兰氏阴性,有细胞壁(G-)
4.专性细胞内寄生
5.以二分裂方式繁殖
6.酶系统不完整,依赖宿主
细胞提供ATP、辅酶I和
辅酶A等才能生长
7.常用接种动物、鸡胚卵黄囊
以及细胞培养;8.对理化因素抵抗力不强,尤对热敏感,56℃30min被灭活,对某些广谱抗生素敏感,但对磺胺药不敏感,反而能促进其生长。
9.致人畜疾病的立克次体多寄生于网状内皮系统、血管内皮细胞或红细胞,寄生于虱、蚤、蜱、螨等节肢动物中,通过叮咬感染人和动物 。
;二、致病性;主要病原性立克次体;普氏立克次体(R.prowazekii);衣原体(Chlamydia); 一、生物学特点
1.革兰氏阴性,圆形或椭圆形
2.细胞壁具有胞质膜及外膜,可含少量肽聚糖。
3.细胞内寄生(鸡胚或细胞培养、动物接种)
4. 须利用宿主细胞的三磷酸盐和中间代谢产物作
为能量来源。
5.独特的发育周期,并以二分裂方式繁殖
6.对某些抗生素(青霉素、红霉素等)敏感;独特的发育周期:两种颗粒结构
元体 (EB):
小而致密,成熟型,有细胞壁
高度易感性;
2. 网状体(RB):
大而疏松,繁殖型,
无细胞壁,不具感染性。;衣原体的发育周期;包涵体(inclusion):是衣原体在细胞空泡内繁殖过程中所形成的集团形态,内含无数子代元体和正在分裂的网状体。;二、分类
衣原体属
亲衣原体属
较重要的衣原体有以下4种:
沙眼衣原体:人的沙眼
肺炎亲衣原体:人的急性呼吸道疾病
鹦鹉热亲衣原体:畜禽肺炎、关节炎、流产,也可引起人的肺炎
牛羊亲衣原体:牛羊关节炎、脑脊髓炎、腹泻;三、致病性;四、诊断
1.分离培养
选肺、关节液、脑脊髓、胎盘等病料
(1)人工培养基不生长,接种
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