实验六维生素C定量测定.pdf

姓名 ：郭沈杰 年级专业 ：2012 级生物科学 同组者 ：蔡萍萍 学号： 12050011012 实验六 维生素 C 的定量测定（2，6-二氯酚靛酚滴定法） 一、实验目的 精品文档，你值得期待 掌握 2 ，6- 二氯酚靛酚法测定维生素 C 的原理和方法。 二、实验原理 维生素 C 又称抗坏血酸 （ascorbic acid ）。在 1928 年， 从牛的肾上腺皮质中提取出的结 晶物质，证明对治疗和预防坏血病有特殊功效，因此称为抗坏血酸。 还原型抗坏血酸能还原染料 2 ，6- 二氯酚靛酚钠盐。本身则氧化成脱氢抗坏血酸。在酸性 溶液中， 2 ，6- 二氯酚靛酚呈红色，被还原后变为无色。 因此可用 2 ，6- 二氯酚靛酚滴定样品中的还原型抗坏血酸。当抗坏血酸全部被氧化后，稍 多加一些染料， 使滴定液呈淡红色， 即为终点。若无其它杂质干扰，样品提取液所还原的标 准染料量与样品中所含的还原型抗坏血酸量呈正比。 三、实验仪器 1 、新鲜水果 2 、电子分析天平 3 、吸管 4 、容量瓶 5 、滴定装置 6 、锥形瓶 7 、研钵 8 、漏斗 四、实验试剂 1 、2% 草酸溶液：草酸 2g ，溶于 100ml 蒸馏水。 2 、 1% 草酸溶液：草酸 1g ，溶于 100ml 蒸馏水。 3 、标准维生素 C 液：准确称取 10.0mg 维生素 C，溶于 1% 草酸溶液， 并稀释至 100ml ， 贮于棕色瓶中，冷藏，最好临用时配制。此溶液浓度 0.1mg/ml. 4 、0.1%2 ， 6- 二氯酚靛酚溶液：称取 500mg2 ，6- 二氯靛酚溶于 300ml 含有 104mg 碳酸氢钠的热水中，冷却，加蒸馏水并稀释至 500ml ，滤去不溶物，贮于棕色瓶中，冷 藏。每次临用时，以标准抗坏血酸液标定。 五、实验步骤 （一）样品中抗坏血酸的提取： 1 、将水果用水洗干净，用滤纸吸取表面水分。 2 、称取 5.0g ，加 2% 草酸试剂 10ml 置研钵中研成浆状。 3 、称取浆状物 5.0g ，倒入 50ml 容量瓶中，用 2% 草酸溶液稀释并定容，混匀，静止 10 分钟，过滤（最初数毫升滤液弃去） ，滤液备用。 （二）滴定： 1 、标准液的滴定：准确吸取标准抗坏血酸溶液 1.0ml 于 100ml 锥形瓶中，加 9ml1% 草酸溶液，用 2 ，6- 二氯靛酚滴定至淡红色。滴定终点要保持 15 秒钟。用所用 2 ， 6- 二氯靛酚的体积算出 1ml 染料相当于多少毫克抗坏血酸。 2 、样品液的滴定：准确吸取滤液两份，每份 10ml ，分别放入两个 100ml 锥形瓶中， 滴定方法同上。 注意事项： 1、滴定过程宜迅速，一般不超过 2min 。 2 、滴定所用染料一般不应少于 1ml 或多于 4ml ，如果样品中含抗坏血酸太高或太低时， 可酌量增减样液。 3 、研磨时要尽量研磨成浆状物。 六、实验结果 将新鲜水果捣成浆状 滴定前稀释： 实验结果计算： 1 、按下式计算 100 样品中含抗血酸的毫克数 m=V*T/W*100 2 、V= 滴定时所用染料数 V （ml ） 1 2 3 平均值 ml 0.44 0.45 0.47 0.453 3 、T= 每毫升染料氧化抗血酸质量 T=1mg 4 、W=10ml 样液相当于含样品的质量数