实验室常见毒物和处理方法.pdf

实验室常见毒物及处理方法 为了保证实验过程中使用有毒物的安全，介绍 17 种化学物质使用过程中的 注意事项和处理方法。 1.DMSO DMSO—二甲基亚砜， 是一种渗透性保护剂， 能够降低细胞冰点， 减少冰晶的 形成，减轻自由基对细胞损害，改变生物膜对电解质、药物、毒物和代谢产物的 通透性。研究表明， DMSO存在严重的毒性作用，与蛋白质疏水基团发生作用， 导致蛋白质变性，具有血管毒性和肝肾毒性。 DMSO用时要避免其挥发，要准备 1%～5%的氨水备用，皮肤沾上之后要用大 量的水以及稀氨水洗涤。 最为常见的为恶心、呕吐、皮疹及在皮肤和呼出的气体中发出大蒜、洋葱、 牡蛎味。吸入：高挥发浓度可能导致头痛，晕眩和镇静。皮肤：能够灼伤皮肤并 使皮肤有刺痛感， 如同所见的皮疹及水泡一样。 若二甲基亚砜与含水的皮肤接触 会产生热反应。 要避免接触含有毒性原料或物质的二甲基亚砜溶液， 因其毒性不 为人所知， 而二甲基亚砜却可能会渗入肌肤， 在一定条件下会将有毒物质代入肌 肤。吸收：吸收危险性很低。 2.EB （Ethidium bromide ，溴化乙锭） 溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂， 用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶 中的 DNA。溴化乙锭用标准 302 nm 紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号，观 察琼脂糖凝胶中 DNA最常用的方法是利用荧光染料溴化乙锭进行染色， 溴化乙锭 含有一个可以嵌入 DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团。 它与 DNA的结合几乎 没有碱基序列特异性。 在高离子强度的饱和溶液中， 大约每 2.5 个碱基插入一个 溴化乙锭分子。 当染料分子插入后， 其平面基团与螺旋的轴线垂直并通过范德华 力与上下碱基相互作用。这个基团的固定位置及其与碱基的密切接近，导致与 DNA结合的染料呈现荧光， 其荧光产率比游离溶液中染料有所增加。 DNA吸收 254 nm处的紫外辐射并传递给染料，而被结合的染料本身吸收 302 nm 和 366 nm 的 光辐射。这两种情况下，被吸收的能量在可见光谱红橙区的 590 nm 处重新发射 出来。由于溴化乙锭 -DNA复合物的荧光产率比没有结合 DNA的染料高出 20～30 倍，所以当凝胶中含有游离的溴化乙锭 （0.5 μg/mL）时，可以检测到少至 10 ng 的 DNA条带。溴化乙锭可以嵌入碱基分子中，导致错配。溴化乙锭是强诱变剂， 具有高致癌性！会在 60～70℃时蒸发（所以最好不要在胶太热的时候加，或者 应该加到液体里， 0.5 μg/mL，染色半小时）（当 EB加得过多时，也可以在室 温用水将已染色的凝胶浸泡 20 min 以降低未结合的 EB引起的背景荧光）。 溴化乙锭溶液的净化处理： 由于溴化乙锭具有一定的毒性， 实验结束后， 应 对含 EB 的溶液进行净化处理再行弃置，以避免污染环境和危害人体健康。 （1）对于 EB含量大于 0.5mg/mL 的溶液，可如下处理： ①将 EB溶液用水稀释至浓度低于 0.5 mg/mL ； ②加入一倍体积的 0.5 mol/L KMnO4，混匀，再加入等量的 2.5 mol/L HCl ， 混匀，置室温数小时； ③加入一倍体积的 2.5 mol/L NaOH ，混匀并废弃。 （