微生物发酵产酶.pptxVIP

1;;微生物发酵产酶的工艺流程;产酶菌种的筛选;? 一个优良的产酶菌种应具备以下几点： a 繁殖快,产酶量高，有利于缩短生产周期??? b 容易培养和管理 ??? c 产酶性能稳定，菌株不易退化，不易受噬菌体侵袭??? d 产生的酶容易分离纯化??? e 安全可靠、无毒性; 酶的发酵生产方式 ①固体培养发酵:把菌种接入固体培养基中,保温数天,用水或缓冲液浸泡培养基,将酶抽提,测定酶活力,这种方法主要适用于霉菌.? 适合于传统发酵工艺及乡镇企业用来生产比较简单的产品。;②液体深层发酵:采用液体培养基,置于生物反应器中，经过灭菌、冷却后，接种产酶细胞，在一定条件下，进行发酵，生产得到所需的酶. 适合于大规模工业化生产。;液体深层发酵优点 ①液体悬浮状态是很多微生物的最适生长条件 ②在液体中菌体、营养物、产物易于扩散，便于控制 ③液体输送方便，易于机械化操作 ④占地面积小，生产效率高，易进行自动化控制 ⑤产品易于提取和精制等;③固定化微生物细胞发酵和固定化微生物原生质体发酵 前者是20世纪70年代后期，在固定化酶的基础上发展起来的发酵技术。是固定在水不溶性的载体上，在一定的空间范围内进行生命活动的细胞。 后者是20世纪80年代中期发展起来的技术。是固定在载体上，在一定的空间范围内进行生命活动的原生质体。;固定化酶的优缺点;第一节 酶生物合成的基本理论 ; 一、酶的生物合成 ;（一）RNA的生物合成--转录(transcription);转录模板;; ;RNA合成过程;原核生物的基因组成;;; 定义 以mRNA为模板，以氨基酸为底物，在核糖体上通过各种tRNA、酶和辅助因子的作用，合成多肽链的过程。;; 蛋白质的合成过程（大肠杆菌）;氨基酸的活化;IF-3;;原核肽链合成终止过程 ;28;29;30;31;32;33;34;35;36;37;38;39;40;41;42;43;44;45;46;47;48;49;?一、 用于酶的生产的细胞必须具备以下几个条件： a 产酶量高??? b 容易培养和管理 ??? c 产酶稳定性好??? d 利于酶的分离纯化??? e 安全可靠、无毒性;二、常用的微生物;农田上层15cm处微生物的数量;菌落数与空气清洁度的关系;细菌的结构;细菌的繁殖：;细菌的??落 定义：单个或者少数细菌在固体培养基上大量繁殖时， 会形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子 细胞群体。 特征：大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等。 功能：每种细菌在一定条件下所形成的菌落可以作为菌 种鉴定的重要依据。;;枯草杆菌;放线菌菌落及形态;;放线菌的分布 放线菌在自然界分布很广，在土壤、堆肥和湖底、河底的淤泥等处，尤其在土壤中种类和数量很多。 放线菌的繁殖 主要通过形成无性抱子形式进行无性繁殖，成熟的生孢子或孢囊孢子在适宜环境里发芽形成新的菌丝体。;链霉菌;酵母菌 主要分布于含糖质较多偏酸性环境中，如水果、蔬菜、花蜜和植物叶片上，果园土壤中，石油酵母多分布在油田周围的土壤中。 多数为腐生，常以单个细胞存在，以发芽形式进行繁殖。;啤酒酵母菌;霉菌 分布很广 土壤、空气、水和生物体内大量存在 偏酸性环境中多数以无性孢子繁殖为主。;米曲霉;菌种的来源 根据需要直接从有关科研单位、高等院校、工厂或菌种保藏部门购买； 从大自然中分离筛选新的微生物菌种。 ;新菌种分离与筛选的步骤： 定方案：先要查阅资料了解所需菌种的生长培养特性 采样：有针对性地采集样品 增殖：通过控制养分或培养条件，使所需菌种增殖培养 分离：利用分离技术得到纯种 发酵性能测定：进行生产性能测定;70;从自然界分离的菌种;;一、细菌活化与扩增培养 活化 一般保存于冷冻管及砂土管或冰箱中的优良生产菌种和选育的新菌种，在正式使用前要先接种到新鲜斜面培养基上，在一定的条件下进行培养，使细胞的生命活性得以恢复。即：把处于休眠状态的菌株唤醒，使其恢复生命活性； ;74;二、培养基;76;77;78;79;80;81;82;83;84;85;三、发酵工艺控制 ;87;几种抗生素发酵的最适pH范围;89;90;91;92;93;94;95;四、提高酶产量的措施 在酶的发酵生产过程中，为了提高酶的产量，除了选育优良的产酶细胞外，还可以采取一些与酶发酵工艺有关的措施，例如添加诱导物、控制阻遏物浓度、添加表面活性剂等。?;1.添加诱导物;???? 2.控制阻遏物浓度 阻遏物控制分为产物阻遏和分解代谢物阻遏两种 控制葡萄糖效应的方法：利用其他难利用的C源，如淀粉；分次流加C源；添加环腺苷酸。 控制产物阻遏的方法：从培养基中去除终产物