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1. 学习革兰氏染色的实验原理与方法
2. 了解细菌革兰氏染色的应用及意义
3. 显微观察;一、革兰氏染色法原理;初染 媒染
复染 脱色;革兰氏染色; 1、制片
(1)涂菌:用无菌操作方法从试管中沾取菌液一环,用接种环在洁净无脂的载玻片上做一薄而均匀、直径约1 cm的菌膜。
(2)干燥:自然干燥或火焰上部略加温加速干燥。
(3)固定:将细菌涂片面向上,通过火焰3次。
;;2、染色(p82-83); 3、显微镜观察(油镜)。;1.菌龄:应选择活跃生长期的培养物作革兰氏染色。培养时间过长,或死亡及部分自溶,改变了细菌细胞壁的通透性,造成阳性菌的假阴性反应。
2.涂片不宜过厚,以免脱色不完全,造成假阳性。
3.革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。如脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性菌;如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也会被染成革兰氏阳性菌。 ;G+;G-;用KOH区分革兰氏染色阴性和阳性细菌*;实验方法:;结 果: 1、 p84 1.(1)、(2):描述(绘)所观察细菌(G+和G-)的个体形态;
2、描述KOH试验的结果;
思考题
1、p84 2.(3)题
2、KOH试验现象直观,可否取代现有染色方法,为什么?;操作考核;下次实验;1.菌龄:应选择活跃生长期的培养物作革兰氏染色。培养时间过长,或死亡及部分自溶,改变了细菌细胞壁的通透性,造成阳性菌的假阴性反应。
2.涂片不宜过厚,以免脱色不完全,造成假阳性。
3.革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。如脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性菌;如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也会被染成革兰氏阳性菌。 ;1.菌龄:应选择活跃生长期的培养物作革兰氏染色。培养时间过长,或死亡及部分自溶,改变了细菌细胞壁的通透性,造成阳性菌的假阴性反应。
2.涂片不宜过厚,以免脱色不完全,造成假阳性。
3.革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。如脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性菌;如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也会被染成革兰氏阳性菌。 ;实验方法:
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