第五章动物细胞制药.pptxVIP

细胞工程;第 三 章动物细胞制药;第一节 概 述;第二节 动物细胞的形态和生理特点;;;;二、动物细胞的化学组成和代谢;三、动物细胞的生理特点;;;;;;;;第三节 生产用动物细胞的要求和获得;二、生产用动物细胞的获得;;二倍体细胞有正常细胞的特点： ①染色体组型是2n核型； ②贴壁依赖接触抑制； ③可传代培养50代； ④无致瘤性。 ;;4.融合细胞系 (1)仙台病毒融合法 (2)聚乙二醇融合法 (3)电融合法 5.重组工程细胞系;三、基因工程细胞构建和筛选;;㈠病毒载体; 其作为载体的 优点： ①双链DNA，易重组 ②插入7～8kb DNA不影响正常病毒粒子的形成。 ③多角体蛋白和病毒粒子的形成无直接关系，因此用外源基因更换多角体蛋白基因，仍能形成有感染力病毒粒子；;;;;;; 电穿孔法： 借助电穿孔仪的高压脉冲电场，使细胞膜出现瞬时可逆性小孔，外源DNA沿小孔进入细胞。转化率较高，拷贝数低。;四、常用生产用动物细胞的特性; BHK-21: 从5只无性别的生长1天的地鼠幼鼠肾脏中分离的;成纤维样细胞,核型为2n=44;培养基为DMEM加7%胎牛血清。用于增殖病毒，包括多瘤病毒、口蹄疫病毒、狂犬病毒等并制作疫苗，现已用于工程细胞构建。;;;; Sf-9： 1983年从亲代IPLB—SF21AE中克隆形成。亲代细胞从秋粘虫的蛹卵组织中