中药制剂中各类化学成分分析.pptx

第六章 中药制剂中各类化学成分分析 §1 生物碱类成分分析概述理化性质物理性状（存在的形态，升华性，挥发性，光学活性）碱性溶解性沉淀反应沉淀剂：碘化物复盐、重金属盐、大分子酸显色反应+酸性染料（磺酸肽类）→有色配合物紫外光谱特征游离—易溶于CHCl3，Et2O，EtOH等有机溶剂生物碱盐—水溶性增强生物碱类成分的分离溶剂萃取柱层析（氧化铝、硅藻土、离子交换柱）定性鉴别沉淀反应、显色反应多肽、蛋白质、鞣质等→假阳性反应麻黄碱、秋水仙碱等→假阴性反应马钱子散中生物碱成分的鉴别取马钱子散1g，加浓氨试液数滴及氯仿10ml，浸泡数小时，滤过，取滤液1ml蒸干，残渣加稀盐酸1ml使溶解，加碘化铋钾试液1~2滴，即生成黄棕色沉淀。 定性鉴别薄层色谱鉴别吸附剂：氧化铝、硅胶展开剂：氯仿、苯等显色剂：改良碘化铋钾试剂，碘蒸气等气相色谱麻黄碱、苦参碱、颠茄类生物碱的含量测定液相色谱含量测定总生物碱含量测定 化学分析法 分光光度法 直接测定 离子对萃取比色法酸性染料比色法 BH十十In－→（BH十In－）→BH十·In－ 苦味酸盐比色法 雷氏盐比色法 异羟肟酸铁比色法 （含有酯键结构的生物碱 ）含量测定单体生物碱含量测定 薄层色谱法 高效液相色谱法 液—液分配色谱法（以反相为主，如ODS或C18）改进流动相（硅醇基抑制剂、低浓度的离子对试剂、季铵盐试剂、电解质缓冲液）固定相改进（封尾技术） 液—固吸附色谱法离子交换色谱法（阳离子交换树脂）检测器气相色谱法 §2 黄酮类成分分析概述理化性质物理性状（存在的形态，颜色，挥发性，光学活性）溶解性酸碱性酸性：与酚羟基的数目和位置有关 7,4‘- 二羟基 7-或4‘- 羟基 一般酚 5-羟基碱性游离甙元—易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等黄酮甙—易溶于水、甲醇、乙醇理化性质显色反应还原反应（盐酸镁粉反应）金属盐类试剂的配合反应（铝、铅、锆、镁盐）紫外光谱特征I带(300-400nm) →B环桂皮酰基II带(240-285nm) →A环苯甲酰基黄酮类成分的分离溶剂萃取柱层析（聚酰胺柱）沉淀法定性鉴别显色反应盐酸-镁粉反应金属盐类配合反应定性鉴别薄层色谱鉴别硅胶--分离弱极性黄酮 展开系统：甲苯-甲酸乙酯-甲酸，氯仿-甲醇 聚酰胺--分离含游离酚羟基的黄酮及其苷展开系统：醋酸，醋酸乙酯-甲酸-水等纤维素--分离多糖苷混合物展开系统：正丁醇-乙酸-水，甲酸，乙酸含量测定总黄酮含量测定 紫外分光光度法比色法高效液相色谱法正相色谱硅胶固定相—没有羟基或乙酰化黄酮类成分反相色谱（C18或C8）流动相：甲醇-水-乙酸（磷酸缓冲液），乙腈-水检测器银杏叶提取物总黄酮醇苷含量测定 [含量测定]色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.4%磷酸溶液（50：50）为流动相；检测波长为360nm。理论板数按槲皮素峰计算应不低于2500，山柰素酚峰与异鼠李素峰的分离度应大于1.5。 对照品溶液的制备（略） 供试品溶液的制备 取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约相当于总黄酮醇苷19.2mg的粉末，精密称定，精密加入甲醇20ml，称定重量，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置100ml锥形瓶中，加甲醇10ml、25%盐酸溶液5ml，摇匀，置水浴中加热回流30分钟，迅速冷却至室温，转移至50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，取滤液，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，分别计算槲皮素、山奈素和异鼠李素的含量，按下式换算成总黄酮苷的含量。 总黄酮醇苷含量=（槲皮素含量+山奈素含量+异鼠李素含量）×2.51 §3 三萜皂甙类成分分析概述理化性质物理性状（存在的形态，表面活性，吸湿性）溶解性紫外光谱特征大多无明显的紫外吸收或仅在200nm附近有末端吸收 人参皂甙(A型)甘草酸皂甙元—能溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿等皂甙—可溶于水，易溶于热水、含水稀醇等理化性质显色反应醋酐-浓硫酸反应五氯化锑反应三铝醋酸反应冰醋酸-乙酰氯反应氯仿-硫酸反应金属盐类反应+铅、钡、铜盐→沉淀 酸性皂甙+硫酸铵/醋酸铅/中性盐→沉淀 中性皂甙+碱式醋酸铅/氢氧化钡/碱性盐→沉淀三萜皂甙类成分的分离溶剂萃取柱层析（大孔树脂柱）沉淀法定性鉴别泡沫反应显色反应定性鉴别薄层色谱鉴别吸附剂：硅胶、氧化铝、硅藻土展开剂：三萜皂甙—氯仿-甲醇-水、正丁醇-醋酸乙酯-水等极性较大的体系三萜皂甙元--以苯、氯仿、己烷等为主要组分显色剂三氯醋酸、50%及10%硫酸乙醇液、磷钼酸、浓硫酸-醋酸酐、碘蒸气等含量测定总皂甙含量测定 重量法比色法显色剂：香草醛-硫酸，香草醛-高氯酸，酸酐-硫酸等等三萜皂甙类单体成分含量