放射生物学课件-第二节放射敏感性和细胞存活曲线.pptxVIP

;;我们一般用放射敏感性表示细胞对辐射致伤的敏感程 度，放射敏感性高者在相同剂量照射后产生的损伤效 应重，反之亦然。不同类型细胞对于电离辐射反应程 度不同，辐射敏感性差异很大。早在1906年，法国科 学家Bergonie和Tribondeau对一系列的研究结果进行 归纳发现增殖活跃细胞，以及形态和功能上尚未“成 型”（未分化）细胞容易受到X射线损伤，随即提出 了“组织细胞的辐射敏感性与它们的增殖能力成正比 ，而与它们的分化程度成反比”，这就是放射生物学 领域非常著名的贝-特二氏定律。这是人类揭示的放 射线细胞学效应的第一个定律（规律），尽管有一定 局限性，但其科学意义是毋庸置疑的。;;人体各种组织的辐射敏感性大致可分为4类：高度敏感组 织、中度敏感组织、轻度敏感组织和不敏感组织。……属 于高度敏感组织；……属于中度敏感组织；……属于轻度 敏感组织；……属于不敏感组织。这里面淋巴及卵原细胞 有悖于贝-特定律，即不符合“细胞的辐射敏感性与它们 的增殖能力成正比，而与它们的分化程度成反比”这个定 律，需要特别注意。;;表达体外培养细胞放射敏感性最直接和准确的方式是 通过细胞克隆形成率实验得出的细胞存活曲线及相应 参数。细胞存活曲线以辐照剂量与细胞存活分数之间 的关系来表述。图示就是电离辐射处理后存活细胞份 额的变化，我们可以看到随着照射剂量的提高，存活 细胞的份额是越来越低的。;;首先我们要讲一个关键性的问题，如何来界定存活细胞和死亡细胞，细胞总数应为两者的相加，所以知道了死亡细胞的份额，就知道了细胞存活的份额。;;在放射生物学领域，特别是肿瘤的放射治疗，我们认 为细胞失去分裂的能力并且无法继续生长就是死亡了， 注意，这个定义下，细胞受到电离辐射损伤后可能仍 然保有原来的功能，表面上看起来是完整的，仍然可 以合成蛋白质和DNA，甚至能够完成1-2次的有丝分裂， 但是失去了无限分裂生成大量子代细胞的能力，我们 就定义为细胞死亡。反之，存活的细胞定义为保持了 增殖的完整性，能够无限增殖形成大的克隆或细胞集 落。;克隆形成率=;所以细胞存活曲线是通过细胞克隆???成实验获得的， 具体的实验举例如下，将100个细胞种植到培养皿中， 然后培养7天，之后培养皿中出现了70个细胞克隆，每 一个克隆都是一个细胞经过数次分裂形成的，理论上 100个细胞应该形成100个克隆，可是由于生长培养基 欠佳、细胞悬液计数误差、细胞消化过程中的细胞损 伤，细胞活力不足等原因，导致只有70%的细胞能形成 克隆。这里的70%就是克隆形成率，也就是细胞存活 100%情况下的克隆形成率。;克隆形成率=;如果想获得受到照射后细胞的克隆形成率，我们需要 多接种一些细胞，因为细胞受照后会死亡，细胞接种 数量少可能观察不到细胞克隆。比如我们接种2000个 细胞，然后用8Gy的X射线进行处理，培养7天后形成了 32个克隆，2000个细胞都存活，应该有2000乘以70%即 1400个克隆形成，但是只有32个克隆形成，因为其余 的细胞受到X射线的作用失去了增殖能力，不能形成克 隆了，所以存活分数是32除以1400，约为0.023，也就 是2.3% 。;;细胞克隆形成实验时，一般剂量越高的组，种植的细 胞数量越多，如图所示，0Gy接种100个细胞、2Gy接种 400个细胞、4Gy接种1000个细胞、6Gy接种10000个细 胞，然后可以得到各个剂量点下的存活分数。以剂量 为横坐标，存活分数为纵坐标就可以绘制得到细胞存 活曲线。;细胞存活曲线;细胞存活曲线的参数;在这个模型中，可以用以下几个参数来描述细胞存活 曲线。D0、Dq、D37 D0是指存活分数从0.1降到0.037时所需的剂量。从存 活分数坐标的0.1和0.037两点分别做平行线与曲线的 直线部分相交，然后分别作垂直线与剂量轴相交。剂 量轴上两个相交点剂量之差就是D0.该剂量就是使每个 细胞产生一个使其死亡事件时所需的平均剂量，称为 细胞的平均致死剂量。图中D0值为1Gy，大多数哺乳动 物细胞的D0值在1~2Gy之间。它反映了细胞的辐射敏感 性。;在存活分数坐标轴1.0处（即细胞100%存活）作一条与 横坐标的平行线，与外推线的交点在横坐标上投影点 的剂量即为Dq值，称之为准阈剂量。Dq代表修复亚致 死损伤的能力，即克服单击多靶曲线中“肩宽”所需 的剂量。哺乳动物细胞Dq值通常较小，一般为 0.5~2.5Gy。 D37是指当细胞存活分数为37%时相应的辐射剂量， D37=D0+Dq。