基因组编辑技术及其应用（115页）.pptVIP

基因敲除 基因敲除是将细胞基因组中某基因去除或使基因失去活性的技术。去除原核生物细胞、真核生物的生殖细胞、体细胞或干细胞基因组中的基因等。 广义的基因敲除包括某个或某些基因的完全敲除、部分敲除、基因调控序列的敲除以及成段基因组序列的敲除。常用同源重组的方法。敲除的基因用以观察生物或细胞的表型变化，是研究基因功能的重要手段。 基因敲除 - 发明者 此技术是由马里奥·卡佩奇、马丁·埃文斯与奥利弗·史密斯所开发，最初是以基因敲除小鼠（knockout?mouse，昵称：KO?mouse）完成实验，三人并因此获得2007诺贝尔医学奖。 基因敲除 - 常用技术 一、利用同源重组进行基因敲除 二、利用随机插入突变进行基因敲除 三、RNA干扰引起的基因敲除 四、单克隆抗体—抑制与其相对应的蛋白功能 五、小分子化合物—能与基因或蛋白相互作用 一、利用同源重组进行基因敲除 利用DNA转化技术，将含有目的基因和靶基因同源片段的重组载体导入靶细胞，通过载体与靶细胞染色体上同源序列间的重组，将外源基因整合入内源基因组内，使外源基因得以表达。 二、利用随机插入突变进行基因敲除 大规模的随机插入突变，它为在基因组范围内敲除掉任何一个基因提供了可能。这项技术具有效率高、基因完全失活、容易分离鉴定被插入引起失活的目的基因等优点。随机插入突变可以分为T-DNA插入突变和转座子插入突变。 三、RNA干扰引