第七章：原核生物基因表达调控.pptxVIP

第六章：原核生物基因表达调控;;一、原核生物基因表达调控总论; ;基因表达调控主要表现在二个方面;转录水平上的调控;负转录调控;负控阻遏 阻遏蛋白与效应物结合时，基因不转录。;正转录调控;正控阻遏 有效应物时，激活蛋白处于无活性状态基因不转录。 ;负控诱导;1、原核生物基因调控机制的类型;A、代谢产物对基因活性的调节;诱导调节;阻遏调节 基因是开启的，但由于一些特殊代谢物或化合物的积累将其关闭。 ;阻遏调节;弱化子 在操纵区与结构基因之间的一段可以 终止转录 作用的核苷酸序列，称为弱化子。?; 前 导 区 P O 162 bp E D C B A 123~150 前导RNA 弱化子 高色氨酸时 低色氨酸时 AUG 7kb mRNA ;有葡萄糖的存在即使在培养基中加入乳糖、半乳糖等诱导物，操纵子也不会启动，这种现象称为葡萄糖效应或称为降解物抑制作用。;因为葡萄糖是最方便的能源，细菌所需能源可从葡萄糖得到满足，无需启动其它基因。 ;当细菌生长过程中，氨基酸全面缺乏时，细菌将会产生应急反应，停止全部基因的表达。 产生应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸（pppGpp），是由空载的tRNA所引起的 。 ;空载tRNA会激活焦磷酸转移酶，使ppGpp大量合成，ppGpp的出现会关闭许多基因，PpGpp与pppGpp的作用能够影响一大批操纵子，所以称他们是超级调控子或称为魔斑。;2、启动子与转录起始;-10区与-35区的最佳间距;3、增强子可以提高转录的水平;;;4、RNA聚合酶与启动子的相互作用;（2）酶与启动子的结合;（3）δ因子的结合和解离;5、环腺苷酸受体蛋白对转录的调控;在缺乏葡萄糖时，CAP合成量增加，CAP具有激活乳糖（Lac）等启动子的功能。一些依赖于CRP的启动子缺乏一般启动子所具有的典型的-35区序列特征（TTGACA）。因此RNA聚合酶难以与其结合。 ; CAP能提高酶与启动子结合常数;;二、乳糖操纵子;乳 糖 操 纵 子 的 结 构;乳 糖 存 在 诱 导 基 因 转 录;乳糖(lac)操纵子的表达调控; ;;;;2、CAP的正性调控;cAMP??量与葡萄糖的关系; CAP与DNA位点结合后，造成模板DNA发生大于90度弯曲有利于转录起始。;; 由于P1ac是弱启动子，单纯因乳糖的存在去阻遏使1ac操纵子转录开放，还不能使细胞很好利用乳糖，必须同时有CAP来加强转录活性，细菌才能合成足够的酶来利用乳糖。;1ac操纵子的强诱导既需要有乳糖的存在，又需要没有葡萄糖可供利用，通过CAP的正调控作用，细菌才能充分利用乳糖。 ;三、半乳糖（gal)操纵子;1、Gal操纵子的 结构特征; 它有两个O区，一个在P区上游 –67~-73，而不是在P区与结构基因之间，另一个O区在结构基因galE内部。 ;2、CAP对gal操纵子的作用 ;3、双启动子的生理功能; 所以需要一个不依赖于CAP的启动子（S2）进行本底水平的永久型合成；同时以半乳糖作为碳源供细胞生长，需要一个依赖于CAP的启动子（S1）对高水平合成进行调节。 ;四、色氨酸操纵子trp operon;(一) 阻遏蛋白的负调控;; (二) 弱化子及其作用;１、色氨酸（Trp)操纵子结构特征 O与结构基因trpE之间有140bp的一段先导序列。当Trp浓度升高，能够阻止RNA聚合酶的转录。 ;先导序列含有3对反向重复序列，在被转录生成mRNA时都能够形成发夹式结构，使转录终止。;２、终止转录的作用（弱化机制） A. 当色氨酸浓度低时，生成的tRNAtrp量就少，使核糖体沿mRNA翻译移动的速度慢，赶不上RNA聚合酶沿DNA移动转录的速度，这时核糖体占据1位的机会较多，使1、2不能配对，2、3配对，阻止了3、4生成终止信号的结构，trp操纵元处于开放状态。 ;;B. 当色氨酸浓度增高时，核糖体沿mRNA翻译移动的速度加快，占据到2段的机会增加，2、3配对的机会减少，3、4形成终止结构的机会增多，转录减弱。;C. 当所有氨基酸都不足时，核糖体翻译移动的速度就更慢，甚至不能占据1的序列，结果有利于1、2和3、4发夹结构的形成，于是转录停止。等于告诉细菌：“整个氨基酸都不足，即使合成色氨酸也不